火菇素結(jié)構(gòu)及抗腫瘤活性的初步研究.pdf

1、山東大學(xué)博士學(xué)位論文火菇素結(jié)構(gòu)及抗腫瘤活性的初步研究姓名：劉同軍申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：張長(zhǎng)鎧2002.10.1319873，誤差為01％001％。目前火菇素還沒有簡(jiǎn)便易行的檢測(cè)方法，不利于在提取過程中對(duì)其跟蹤。火菇素用Freund完全佐劑乳化后注射到新西蘭白兔體內(nèi)，經(jīng)數(shù)次加強(qiáng)免疫后采血并分離了抗血清，免疫雙擴(kuò)散顯示它能與火菇素形成免疫沉淀線，當(dāng)抗原濃度為lm∥mL時(shí)，抗血清效價(jià)在1：16以上。根據(jù)火茹素在血清平板上免

2、疫單向瓊脂擴(kuò)散的結(jié)果，建立了不同濃度火菇素免疫反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，可用于火菇素的定量檢測(cè)。然后據(jù)此對(duì)在4。C下保存的火菇素進(jìn)行了長(zhǎng)期跟蹤檢測(cè)，結(jié)果表明，在保存過程中火菇素的活性逐步降低，同時(shí)其二級(jí)結(jié)構(gòu)也被破壞，火菇素比較容易長(zhǎng)期保存。3火菇素經(jīng)SDSPAGE后，進(jìn)行膠內(nèi)原位酶切，利用MALDI—TOF—MS分析肽指紋圖譜得到12個(gè)大小不同的肽段，檢索NCBI蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)，知火菇素為～新蛋白。為闡明火菇素蛋白的結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系并揭示抗癌機(jī)理，

3、使其更好地發(fā)揮I腦床作用，用多種光譜測(cè)定了火菇素的構(gòu)象。包括紫外光譜、紅外光譜、圓二色譜、顯微共焦拉曼光譜等，并用蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)解析程序分析了火菇r素的溶液二級(jí)結(jié)構(gòu)。f火菇素的紫外吸收結(jié)果表明，其最大吸收波長(zhǎng)在276278tun處，最小吸收波長(zhǎng)在249252nlTl處；紅外吸收?qǐng)D中，在3300、2900、1650、1500、1400cm。處出現(xiàn)數(shù)個(gè)強(qiáng)吸收峰。火菇素遠(yuǎn)紫外圓二色性的研究表明。其水溶液在208rim處表現(xiàn)為寬大負(fù)峰，最大平均