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文檔簡介
1、目的:研究熱休克蛋白70(HSP70)對MCF-7人乳腺癌細胞增殖的影響,并對其機制進行初步探討。 方法:將MCF-7細胞經(jīng)不同濃度的Hsp70處理3天,作細胞計數(shù)及采用MTT法檢測MCF-7細胞活性情況;RT-PCR法檢測經(jīng)HSP70處理3天后,MCF-7細胞在TLR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中相關(guān)基因cyclinD1a、cyclinD1b的表達水平;培養(yǎng)3天后MCF-7細胞,快速加人HSP70,分別在作用0分鐘、5分鐘、15分鐘、30分鐘
2、、60分鐘后采用 Western Blot檢測TLR信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中相關(guān)信號分子磷酸化ERK1/2,磷酸化I-κB的水平情況。 結(jié)果:細胞計數(shù)、MTT結(jié)果顯示,加Hsp70組細胞數(shù)與細胞活性均明顯增加,MCF-7細胞增殖明顯;經(jīng)Hsp70處理3天后的MCF-7細胞,采用RT-PCR方法檢測cyclinD1a、cyclinD1b的表達,結(jié)果顯示,cyclinD1a明顯表達增加,而cyclinD1b沒有擴增出任何片段;采用 West
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