木脂素對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞抗增殖作用及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：研究從植物紅楠中提取的木脂素對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞的抗增殖作用，并初步探討其作用機(jī)制。
　　方法：實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，對(duì)照組：不加木脂素的MCF-7乳腺癌細(xì)胞；實(shí)驗(yàn)組：加不同濃度木脂素的MCF-7乳腺癌細(xì)胞，每組細(xì)胞分別培養(yǎng)24、48和72 h。倒置顯微鏡觀察MCF-7乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)情況，應(yīng)用MTT方法檢測(cè)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間段的細(xì)胞生存率，并采用免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)Bax、Bcl-2、p21、p27及c-myc蛋白的表

2、達(dá)，流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組細(xì)胞周期及細(xì)胞凋亡率。
　　結(jié)果：(1)形態(tài)學(xué)觀察:倒置顯微鏡觀察，對(duì)照組MCF-7乳腺癌細(xì)胞增殖能力隨培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)明顯增強(qiáng)，而用木脂素處理的實(shí)驗(yàn)組MCF-7乳腺癌細(xì)胞增殖明顯受抑制，細(xì)胞凋亡數(shù)明顯增高。
　　(2)MTT檢測(cè)結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組 MCF-7乳腺癌細(xì)胞生存率明顯降低，具有濃度和時(shí)間依賴性，與對(duì)照組相比均有顯著性差異。
　　(3)免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果，在24、48和72h時(shí)

3、對(duì)照組乳腺癌細(xì)胞Bcl-2、c-myc蛋白的表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性，Bax、p21及p27蛋白的表達(dá)呈弱陽(yáng)性，而實(shí)驗(yàn)組24、48和72h時(shí)乳腺癌細(xì)胞Bcl-2、c-myc蛋白的表達(dá)呈弱陽(yáng)性，Bax、p21及 p27蛋白的表達(dá)呈強(qiáng)陽(yáng)性，與對(duì)照組相比均有顯著性差異。
　　(4)利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率及細(xì)胞周期結(jié)果，對(duì)照組MCF-7乳腺癌細(xì)胞凋亡率為0.01％，實(shí)驗(yàn)組MCF-7乳腺癌細(xì)胞凋亡率在48和72h時(shí)分別為23.55%和29.03%

4、，與對(duì)照組相比均有顯著性差異。細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果，G1期、G2期、S期細(xì)胞百分比對(duì)照組為55.6%、16.17%和28.23%；實(shí)驗(yàn)組48 h和72 h時(shí)分別為66.63%、9.67%和23.69%：64.25、11.13和24.62%。
　　結(jié)論：木脂素對(duì)MCF-7乳腺癌細(xì)胞具有明顯的抗增殖作用，其機(jī)制之一是通過上調(diào)Bax蛋白，下調(diào)Bcl-2蛋白的表達(dá)，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡；同時(shí)通過增強(qiáng)p21及p27蛋白的表達(dá)，抑制c-Myc蛋白的表