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1、目的:研究TAP直接作用于大鼠胰腺腺泡細(xì)胞時(shí)是否誘導(dǎo)了HMGB1的表達(dá)釋放,從細(xì)胞領(lǐng)域初步探討急性胰腺炎早期的TAP與晚期的HMGB1之間是否存在著正向的必然聯(lián)系,以及EP對(duì)HMGB1的抑制作用。
方法:將12只SD大鼠處死后,取出胰腺分離胰腺腺泡細(xì)胞,將所得細(xì)胞懸液等分為3組,對(duì)照組(A組)、TAP組(B組)、EP組(C組)。B組、C組加入不同劑量TAP(1nmol/L、2nmol/L、3nmol/L),C組同時(shí)加入EP
2、(28mmol/L),在3h、6h、12h、24h分別取細(xì)胞采樣。實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)HMGB1mRNA表達(dá);蛋白印跡法(Western-blot)檢測(cè)HMGBl蛋白質(zhì)的表達(dá)。并進(jìn)行HMGB1mRNA、蛋白的表達(dá)與TAP濃度及作用時(shí)間的相關(guān)性分析。
結(jié)果:與A組比較,B組、C組各樣品中HMGB1mRNA、蛋白表達(dá)隨TAP濃度升高上調(diào);與B組比較,C組各樣品中HMGB1 mRNA、蛋白表達(dá)下調(diào)(P<
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