JAK2-STAT3信號(hào)通路在TAP誘導(dǎo)大鼠胰腺腺泡細(xì)胞釋放HMGB1中的作用.pdf

1、目的：通過(guò)研究JAK/STAT信號(hào)通路是否參與了TAP誘導(dǎo)大鼠胰腺腺泡細(xì)胞HMGB1的表達(dá)釋放，初步探究證實(shí)影響急性胰腺炎HMGB1表達(dá)釋放的信號(hào)通路，從而在臨床通過(guò)抑制信號(hào)通路來(lái)干擾HMGB1的表達(dá)釋放，預(yù)防炎癥加重及誘發(fā)SIRS、MODS，為臨床預(yù)防、治療SAP等重癥炎癥性疾病，減少并發(fā)癥提供新的途徑。
　　 方法：將12只SD大鼠處死后，取出胰腺分離胰腺腺泡細(xì)胞，將所得細(xì)胞懸液等分為4組，①A組：正常對(duì)照組②B組：促進(jìn)組(

2、TAP組)，在胰腺腺泡細(xì)胞中加入TAP(終濃度3nmol/L)③C組：抑制組1(JAK2抑制劑-AG490組)，AG490(終濃度25μmol/L)于TAP誘導(dǎo)前1h加入培養(yǎng)細(xì)胞④D組：抑制組2(STAT3抑制劑-雷帕霉素)(RPM)組，RPM(終濃度40ng/ml)于TAP誘導(dǎo)前1h加入培養(yǎng)細(xì)胞。在3h、6h、12h、24h分別取細(xì)胞采樣。實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)HMGB1mRNA表達(dá)；蛋白印跡法(Western

3、-blot)檢測(cè)HMGB1蛋白質(zhì)的表達(dá)。并用SPSS17.0軟件對(duì)各組HMGB1mRNA、蛋白的表達(dá)量作統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，對(duì)各組進(jìn)行作用時(shí)間與HMGB1mRNA表達(dá)的線性回歸分析。
　　 結(jié)果：與A組比較，B組各時(shí)間點(diǎn)HMGB1mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著升高(P<0.01)；與B組比較，C組12h、24h HMGB1mRNA相對(duì)表達(dá)量顯著降低(P<0.01)；12h、24h HMGB1蛋白相對(duì)表達(dá)量顯著降低(P<0.01)；與B組比

4、較，D組6h的HMGB1mRNA降低(P<0.05)，12h、24h顯著降低(P<0.01)；12h、24h HMGB1蛋白相對(duì)表達(dá)量有顯著降低(P<0.01)。且B、C、D組其HMGB1mRNA相對(duì)表達(dá)量隨時(shí)間的推移呈增高趨勢(shì)。
　　 結(jié)論：TAP可直接誘導(dǎo)胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)HMGB1的釋放。AG490與雷帕霉素可抑制TAP誘導(dǎo)胰腺腺泡細(xì)胞HMGB1的釋放。JAK2/STAT3信號(hào)通路參與了TAP誘導(dǎo)胰腺腺泡細(xì)胞HMGB1的釋放。