遺傳性對稱性色素異常癥ADAR1基因突變檢測.pdf

1、研究背景:
　　 遺傳性對稱性色素異常癥(Dyschromatosis sYmmetric hereditaria，DSH，MIM127400)，又名Dohi對稱性肢端色素沉著癥，為常染色體顯性遺傳的良性皮膚病，主要臨床特點是肢體末端由色素沉著和色素減退形成的網狀斑，皮損主要分布于手背及腳背，部分患者面部可有雀斑樣損壞。本病常于嬰兒期或者兒童期發(fā)病，青春期停止發(fā)展，并持續(xù)終生。2003年，張學軍等采用全基因組掃描的方法對2個家系

2、進行分析，第一次將本病致病基因定位在1q11-1q21區(qū)間約116cM的區(qū)域隨后，日本學者Miyamura等對四個DSH家系進行全基因組掃描，將本病的致病基因精細定位于1q21.3約500kb的區(qū)域內，并在這四個家系中均發(fā)現雙鏈RNA特異性腺苷脫氨酶基因（DSRAD/ADAR1基因）的雜合突變，本突變在正常對照中未發(fā)現，證明這些堿基的改變是突變不而是多態(tài)，因此首次確定了DSRAD/ADAR1基因為本病的致病基因。DSRAD/ADAR1基

3、因是一種雙鏈RNA特異性腺昔脫氨酶，主要生物學功能包括RNA編輯和誘導蛋白質在核內的翻譯。該基因所編碼的雙鏈RNA特異性的腺苷酸脫氨酶選擇性的作用于前體信使RNA，將特殊位點上的腺嘌呤核苷(A)經過脫氨基作用轉換成次黃嘌呤核苷(I)，次黃嘌呤核苷在堿基配對中相當于鳥嘌呤(G)和胞嘧啶(C)的配對，導致雙鏈RNA結構的不穩(wěn)定及mRNA降解，并由此產生特定的生理學效應。迄今為止，國內外共發(fā)現了121個有關DSH的ADARI基因突變位點，遺憾

4、的是，沒有發(fā)現熱點突變。本研究收集4個DSH散發(fā)病例，通過DNA直接測序對其ADAR1基因進行了檢測。
　　 目的:
　　 對4個散發(fā)的遺傳性對稱性色素異常癥病例的ADAR1基因進行突變檢測。
　　 方法:
　　 收集整理4個散發(fā)的遺傳性對稱性色素異常癥患者的臨床資料。獲得知情同意后，抽取患者血樣，提取患者外周血脫氧核糖核苷酸(DNA)，采用聚合酶鏈反應擴增患者和100名無親緣關系的正常對照個體ADARI

5、基因的全部外顯子序列，然后對PCR擴增產物直接測序并進行序列分析，檢測該基因突變。
　　 結果:
　　 通過對4個散發(fā)的遺傳性對稱性色素異常癥患者ADARI基因的突變檢測，檢測到1個曾被報道過的錯義突變3463C＞T(p.R1155W)和兩個未曾報道的突變：1605delT(p.F535fs)框移突變和c.1630C＞T(p.R544x)無義突變。而在100例正常對照中均為發(fā)現上述突變。
　　 結論: