ABCB6突變導(dǎo)致遺傳性泛發(fā)型色素異常.pdf

1、遺傳性泛發(fā)型色素異常癥(DUH)是一種遺傳性皮膚色素異常,以全身泛發(fā)性色素沉著斑和色素減退斑相互夾雜存在為典型特征。該病與1933年被報(bào)道,但發(fā)病的病理機(jī)制尚不清楚。遺傳學(xué)上已發(fā)現(xiàn)兩個(gè)DUH致病位點(diǎn),分別定位于6q24.2-q25.2和12q21-q23,但迄今為止其致病基因尚未被克隆。
　　本論文中,我們研究了一個(gè)湖北棗陽五代漢族DUH家系,首先通過微衛(wèi)星連鎖分析將致病基因定位于2q33.3-2q36.1,其中微衛(wèi)星標(biāo)記D2S2

2、382的LOD值為3.49。將家系中一個(gè)正常和兩個(gè)病人的DNA樣本進(jìn)行外顯子測(cè)序,結(jié)果發(fā)現(xiàn)了29個(gè)變異。這29個(gè)變異中位于2q33.3-2q36.1的僅有位于ABCB6基因內(nèi)的c.1067T>C(p.Leu356Pro),家系中的其他成員的DNA測(cè)序,發(fā)現(xiàn)家系中所有的病人都含有這個(gè)突變,而所有的正常人都不攜帶此突變。對(duì)500個(gè)湖北正常人進(jìn)行ABCB6的c.1067T>C突變驗(yàn)證,在所有正常人對(duì)照中均未檢測(cè)到此突變。在6個(gè)散發(fā)的DUH病人

3、中,進(jìn)行ABCB6基因突變分析,發(fā)現(xiàn)其中的兩個(gè)病人分別具有兩個(gè)不同的ABCB6錯(cuò)義突變,分別為c.508A>G(p.Ser170Gly)和c.1736G>A(p.Gly579Glu),而對(duì)400個(gè)正常人進(jìn)行DNA測(cè)序驗(yàn)證,均未發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)突變。
　　ABCB6是ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(ATP-bindingcassettetransporter)家族成員。為從功能上了解釋ABCB6與DUH發(fā)病之間的關(guān)系,我們首先檢測(cè)了ABCB6在皮膚組織和

4、細(xì)胞中的表達(dá)。取正常人表皮進(jìn)行免疫組化檢查,發(fā)現(xiàn)ABCB6在表皮基底層中高表達(dá),并在黑素細(xì)胞和角質(zhì)化細(xì)胞中都呈現(xiàn)胞質(zhì)定位。人黑素瘤細(xì)胞A375和人角質(zhì)化細(xì)胞系HaCaT中的Western蛋白印跡實(shí)驗(yàn),證實(shí)了ABCB6在這兩種表皮細(xì)胞中均有表達(dá)。進(jìn)一步構(gòu)建ABCB6野生型及三個(gè)突變型的EGFP融合蛋白,在鼠黑素瘤細(xì)胞B16-F1中觀察ABCB6蛋白的亞細(xì)胞定位,發(fā)現(xiàn)ABCB6在細(xì)胞質(zhì)中呈現(xiàn)類似黑素小體的分布,并且可在突觸中聚集,而導(dǎo)致DU

5、H的突變則破壞了ABCB6蛋白的正常定位,突變型ABCB6蛋白不能呈現(xiàn)在細(xì)胞質(zhì)中的正常分布,主要滯留在細(xì)胞核周圍的高爾基體中。
　　本論文鑒定了第一個(gè)遺傳性泛發(fā)型色素異常的致病基因,并對(duì)ABCB6突變引起DUH的病理機(jī)制進(jìn)行初步研究。我們的發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步研究ABCB6功能,揭示DUH這一疾病的分子病理機(jī)制打下了良好的基礎(chǔ)。人類皮膚色素形成是一個(gè)復(fù)雜而有趣的生理過程,受到內(nèi)外環(huán)境因子的精確調(diào)控,發(fā)現(xiàn)ABCB6作為一個(gè)新的色素調(diào)控因子,