新生血管與斑塊穩(wěn)定性的關系及VEGF基因干預的研究.pdf

1、本文包括四部分： 1、目的：構建攜帶人VEGF<,165>基因的重組腺病毒。結(jié)論：通過雙質(zhì)粒細胞同源重組，生產(chǎn)攜帶人VEGF<,165>基因的重組腺病毒ad.VEGF，為動物試驗奠定基礎。 2、目的：利用RNA干擾(RNA interference，RNAi)技術，以小鼠VEGFa基因(NM_001025257)為靶基因，構建攜帶短發(fā)夾狀干擾RNA(siRNA)的慢病毒載體。結(jié)論：通過RNA干擾技術，成功設計、篩選、生產(chǎn)

2、針對小鼠VEGFa基因沉默的特異性siRNA慢病毒，為動物試驗奠定基礎。 3、目的：建立apoE<'-/->小鼠頸動脈粥樣斑塊模型，將攜帶目的基因病毒經(jīng)動脈外膜轉(zhuǎn)染動脈粥樣斑塊，通過促進或抑制粥樣斑塊內(nèi)新生血管形成，明確粥樣斑塊內(nèi)新生血管形成、斑塊內(nèi)出血、粥樣斑塊破裂的相互關系及其機制。結(jié)論：(1)通過頸動脈外膜局部轉(zhuǎn)染方式，可將目的基因高效轉(zhuǎn)染粥樣斑塊。(2)粥樣斑塊局部轉(zhuǎn)染Ad.VEGF<,165>，促進斑塊內(nèi)新生血管形成，

3、增加粥樣斑塊破裂發(fā)生率。(3)VEGFa基因沉默顯著抑制粥樣斑塊進展，降低粥樣斑塊易損指數(shù)，增加粥樣斑塊穩(wěn)定性。 4、目的：人類動脈粥樣硬化病變主要發(fā)生在大、中動脈彎曲、分又及狹窄部位，如主動脈弓、頸動脈分支、冠狀動脈、腹主動脈分支和股動脈分支等血流緩慢或渦流部位，即低管壁剪切力區(qū)。ApoE<'-/->小鼠是研究動脈粥樣硬化較理想動物模型，但小鼠主動脈管壁剪切力約為人主動脈管壁剪切力的20倍。利用Visualsonics Ve