動(dòng)脈粥樣硬化斑塊內(nèi)血管新生與斑塊穩(wěn)定性及活血化瘀中藥干預(yù)效應(yīng)研究.pdf

1、動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)不穩(wěn)定斑塊的破裂是急性血栓事件發(fā)生的主要病因之一,因此穩(wěn)定斑塊、預(yù)防斑塊破裂,甚至阻止動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展,消退AS斑塊的治療方法具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
　　 近年的研究發(fā)現(xiàn):AS斑塊內(nèi)常出現(xiàn)病理性新生血管,它們可能促進(jìn)粥樣硬化病變的發(fā)展,甚至誘發(fā)斑塊內(nèi)出血和斑塊破裂及其并發(fā)癥的發(fā)生。因此,抑制斑塊內(nèi)血管新生可能成為增強(qiáng)斑塊穩(wěn)定性,防治急性冠脈綜合征的靶點(diǎn),具有潛在的治療意義

2、。
　　 現(xiàn)代藥理研究證實(shí),大多數(shù)活血化瘀藥物都具有抗動(dòng)脈粥樣硬化和促進(jìn)血管新生的作用,那么活血化瘀藥物在促進(jìn)血管新生同時(shí)是否影響了斑塊的穩(wěn)定性,就成為活血化瘀抗心肌缺血臨床應(yīng)用關(guān)注的重要問(wèn)題。芎芍膠囊(XiongshaoCapsule,XSC)是從經(jīng)典活血化瘀代表方血府逐瘀湯不斷簡(jiǎn)化精制而成,由傳統(tǒng)活血化瘀中藥赤芍、川芎的有效部位赤芍總苷和川芎總酚組成,課題組前期研究顯示其具有穩(wěn)定AS斑塊的作用,但對(duì)AS斑塊內(nèi)血管新生是否有影

3、響,有待深入研究。
　　 本課題采用家兔腹主動(dòng)脈球囊剝脫加高脂喂養(yǎng)復(fù)制動(dòng)脈粥樣硬化模型,探討斑塊內(nèi)血管新生與斑塊穩(wěn)定性之間的關(guān)系,觀察活血化瘀制劑芎芍膠囊對(duì)AS斑塊穩(wěn)定性及斑塊內(nèi)血管新生的影響,為該藥臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 本課題研究分為兩部分:文獻(xiàn)綜述和實(shí)驗(yàn)研究。
　　 1文獻(xiàn)綜述:本部分從動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊與斑塊內(nèi)血管新生的研究進(jìn)展方面進(jìn)行了綜述。
　　 2實(shí)驗(yàn)研究:芎芍膠囊對(duì)兔動(dòng)脈粥樣硬化模

4、型斑塊內(nèi)血管新生及斑塊穩(wěn)定性的影響。
　　 目的:研究動(dòng)脈粥樣硬化模型斑塊內(nèi)血管新生及斑塊穩(wěn)定性的相關(guān)性,觀察芎芍膠囊對(duì)兔動(dòng)脈粥樣硬化模型斑塊內(nèi)血管新生及斑塊穩(wěn)定性的影響,并探討其作用機(jī)制。
　　 方法:50只新西蘭兔隨機(jī)分為正常組、模型組、辛伐他汀組、XSC低劑量組和XSC高劑量組,每組10只。正常組普通飼料喂養(yǎng),其余各組高脂飼料喂養(yǎng),2周后測(cè)血脂確認(rèn)已形成高脂血癥,行腹主動(dòng)脈球囊剝脫術(shù),建立動(dòng)脈粥樣硬化模型,繼續(xù)高脂

5、喂養(yǎng),辛伐他汀組給予辛伐他汀2.5mg/(kg·d),XSC低、高劑量組分別給予芎芍膠囊0.24g/(kg·d)和0.48g/(kg·d),連續(xù)給藥6周后,各組采血測(cè)血脂；酶聯(lián)免疫法測(cè)定血清高敏C反應(yīng)蛋白(hsCRP)、腫瘤壞死因子(TNV-α)、基質(zhì)金屬蛋白酶-3,-9(MMP-3,-9)和MMP組織抑制因子-1(TIMP-1)的表達(dá)；取腹主動(dòng)脈HE染色光鏡觀察斑塊組織大體病理形態(tài),利用圖像軟件定量測(cè)量斑塊面積(PA)、血管橫截面積(

6、CVA)及校正斑塊面積(PA/CVA)；免疫組織化學(xué)法檢測(cè)斑塊組織血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)及第八因子相關(guān)抗原(FⅧRAg)、MMP-3及白細(xì)胞分化抗原40配體(CD40L)的蛋白表達(dá)。指標(biāo)間的相關(guān)性采用直線(xiàn)相關(guān)分析。
　　 結(jié)果:①模型組兔腹主動(dòng)脈內(nèi)膜可見(jiàn)明顯的脂質(zhì)斑塊形成,有的整條主動(dòng)脈內(nèi)膜可見(jiàn)彌漫分布脂質(zhì)斑塊形成。辛伐他汀組和XSC低、高劑量組兔腹主動(dòng)脈內(nèi)膜雖可見(jiàn)脂質(zhì)斑塊形成,較模型組明顯較輕。HE染色模型組腹主動(dòng)脈己形

7、成明顯的動(dòng)脈粥樣硬化斑塊,內(nèi)膜明顯增厚,內(nèi)含大量泡沫細(xì)胞,內(nèi)皮下、斑塊內(nèi)有膽固醇結(jié)晶,纖維帽形成。各藥物干預(yù)組內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、變性減輕,泡沫細(xì)胞及脂質(zhì)沉積較模型組減少。②藥物干預(yù)前血脂結(jié)果表明,模型組、辛伐他汀組和XSC低、高劑量組血清TC、TG和LDL-C水平較正常組均有顯著升高(P<0.01),4組之間則無(wú)明顯差異(P>0.05)。藥物干預(yù)6周后,辛伐他汀組和XSC低、高劑量組血清TC較同期正常組仍有顯著升高(P<0.01),但較同期

8、模型組均有不同程度降低(P<0.05,P<0.01)；此外辛伐他汀組還顯著降低血清TG和LDL-C。③血清hsCRP模型組明顯高于正常組,辛伐他汀組和XSC低、高劑量組均比模型組明顯降低(P<0.05,P<0.01)。④與模型組相比,辛伐他汀組和XSC低、高劑量組血清MMP-3、MMP-9水平顯著下降(P<0.05)；同時(shí)斑塊內(nèi)MMP-3和CD40L表達(dá)也明顯降低(P<0.05,P<0.01)。⑤斑塊組織病理形態(tài)變化顯示,各組之間PA、

9、CVA差異無(wú)顯著性(P>0.05),但辛伐他汀組和XSC低、高劑量組與模型組比較可顯著降低PA/CVA、PC(P<0.05,P<0.01)。XSC高劑量組可明顯減少M(fèi)PT,與模型組比較差異有顯著性(P<0.01)。⑥藥物干預(yù)6周后,XSC低、高劑量組和辛伐他汀組VEGF和FⅧRAg較模型組有顯著性降低(P<0.05,P<0.01)。⑦VEGF與PA/CAV相關(guān)分析表明,兩者具有相關(guān)性,呈正相關(guān)(r=0.770,P<0.01)；MMP-3