新型光敏劑CPD4聯(lián)合阿霉素對MCF-7細胞增殖及周期作用的研究.pdf

1、目的：新型光敏劑CPD4聯(lián)合阿霉素(ADM)對MCF-7細胞增殖和周期的研究。從細胞水平、物理學(xué)角度闡述ADM對新型光敏CPD4光動力效應(yīng)產(chǎn)生影響的作用機制，為臨床開辟新的治療方法提供理論依據(jù)。 方法：實驗分為六個階段進行。分別采用MTT比色法篩選阿霉素濃度；分析阿霉素與光敏劑CPD4的光譜特點，測兩者混合液的吸收光譜，觀察阿霉素對CPD4吸收光譜的影響；染料排斥法觀察各組細胞的抑制率；應(yīng)用流式細胞術(shù)分析各組細胞凋亡率；用流式細

2、胞術(shù)分析各組細胞周期的變化及測量細胞平均熒光強度。 結(jié)果： 1、ADM對MCF-7細胞抑制率有明顯的時間-濃度依賴效應(yīng)，低濃度組為10ng/ml、20ng/ml，對MCF-7細胞的抑制率<10％，高濃度組50ng/ml對MCF-7細胞的抑制率<25％。 2、阿霉素的兩個吸收峰位于233m、480nm。ADM與光敏劑的混合溶液的熒光光譜顯示，兩者的熒光峰發(fā)生藍移。 3、ADM預(yù)處理MCF-7細胞24小時、4

3、8小時后加入CPD4孵育2小時光照，24小時后0.2％伊紅排斥法測細胞抑制率，倒置顯微鏡下觀察，初步顯示ADM能增強CPD4的光動力效應(yīng)。 4、流式細胞儀分析細胞凋亡率結(jié)果顯示ADM預(yù)處理后能夠增加CPD4對MCF-7的光動力效應(yīng)。 5、ADM預(yù)處理MCF-7細胞相應(yīng)的時，24小時后分析細胞周期，細胞主要阻滯在G2/M期。PDT主要將細胞阻滯在G0/G1。聯(lián)合用藥組主要將細胞阻滯在G2/M期。 6、ADM(20n

4、g/ml)預(yù)處理MCF-7細胞，對細胞熒光強度無明顯影響；CPD4孵育2小時后對照組熒光強度較平穩(wěn)，ADM預(yù)處理24小時、48小時組細胞熒光強度逐漸降低。三組細胞的熒光強度均在CPD4孵育2小時最高，且ADM預(yù)處理48小時組>預(yù)處理24小時>對照組。 結(jié)論： 1、ADM3個濃度分別為10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml。 2、ADM對細胞無光動力效應(yīng)；混合溶液熒光光譜顯示ADM可能與光敏劑結(jié)合，實驗中避