姜黃素水凝膠對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞抗增殖作用的研究.pdf

1、乳腺癌的治療是腫瘤領(lǐng)域里一個(gè)重要的課題。國(guó)內(nèi)外眾多研究者發(fā)現(xiàn)姜黃素能有效抑制癌細(xì)胞的增殖。然而姜黃素的水溶性差和生物利用率低等特性又一定程度限制了其在臨床治療方面的廣泛應(yīng)用。為了改善姜黃素的相關(guān)性能，本研究設(shè)計(jì)合成了一種新型的姜黃素化合物 Cur-FFE-ss-ERGD，并探討了該化合物和它的還原物在抑制MCF-7細(xì)胞增殖方面的作用和相關(guān)機(jī)制。
　　目的:
　　合成一種新型的姜黃素小分子多肽水凝膠成膠前體因子以提高姜黃素的水

2、溶性，然后觀察姜黃素水凝膠及其成膠前體因子對(duì)乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖和凋亡的影響并初步分析其分子機(jī)制。
　　方法:
　　1、設(shè)計(jì)并通過(guò)固相合成法合成姜黃素小分子多肽水凝膠成膠前體因子Cur-FFE-ss-ERGD，并將其還原成姜黃素小分子多肽水凝膠Cur-FFE-SH；
　　2、用LC-MS分析姜黃素小分子多肽水凝膠Cur-FFE-ss-SH對(duì)姜黃素的釋放能力；
　　3、CCK-8法檢測(cè)姜黃素小分子多肽水凝膠及前

3、體因子對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7的增殖的影響；
　　4、流式細(xì)胞術(shù)分析姜黃素小分子多肽水凝膠及前體因子對(duì)MCF-7細(xì)胞凋亡的影響；
　　5、qRT-PCR技術(shù)和Western Blot法測(cè)定Bcl-2和Bax基因的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1、通過(guò)多肽固相合成法合成了姜黃素小分子多肽水凝膠成膠前體因子Cur-FFE-ss-ERGD，其分子質(zhì)量為1597.72。加入還原性GSH后即可形成姜黃素小分子多肽水凝膠Cur-FF

4、E-SH。
　　2、LC-MS儀測(cè)試的12小時(shí)里，姜黃素小分子多肽水凝膠Cur-FFE-SH具備對(duì)姜黃素進(jìn)行緩慢釋放的能力，且釋放的速度一致，平均約為每小時(shí)0.08?g/mL。
　　3、CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞的增殖，結(jié)果顯示相對(duì)對(duì)照組，姜黃素水凝膠前體和姜黃素水凝膠對(duì)MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)都有抑制作用，而且這種抑制作用呈劑量和時(shí)間依賴關(guān)系。
　　4、FCM檢測(cè)結(jié)果表明40?mol/L的姜黃素水凝膠和姜黃素水凝膠前體作用于M

5、CF-7細(xì)胞24h，可以促使細(xì)胞凋亡，凋亡率分別為11.84％和16.12%。
　　5、qRT-PCR分析顯示40?mol/L的姜黃素水凝膠和姜黃素水凝膠前體在下調(diào)MCF-7細(xì)胞中Bcl-2 mRNA表達(dá)水平的同時(shí)可上調(diào)Bax mRNA的表達(dá)水平。
　　6、Western Blot結(jié)果顯示在姜黃素水凝膠和姜黃素水凝膠前體作用于MCF-7細(xì)胞后，其Bcl-2蛋白水平下調(diào)，Bax蛋白水平上調(diào)。
　　結(jié)論:
　　合成的