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文檔簡介
1、目的:
研究姜黃素( Curcumin)對(duì)人乳腺癌阿霉素耐藥細(xì)胞株MCF-7/DOX殺傷與耐藥的影響及其作用機(jī)制,為姜黃素的臨床應(yīng)用提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:
1采用MCF-7細(xì)胞持續(xù)接觸阿霉素的方法進(jìn)行培養(yǎng),逐步遞增阿霉素的濃度,體外誘導(dǎo)建立阿霉素耐藥細(xì)胞株MCF-7/DOX。
2 MTS法測定姜黃素與阿霉素作用后MCF-7/DOX細(xì)胞生長抑制效應(yīng),流式細(xì)胞儀檢測姜黃素對(duì)細(xì)胞內(nèi)阿霉素水平的平均熒
2、光強(qiáng)度。
3 RT-PCR法檢測兩種細(xì)胞MDR1 mRNA表達(dá)水平,Western blot法檢測細(xì)胞MDR1蛋白的表達(dá)水平,BSP法檢測MDR1基因甲基化水平的變化。
結(jié)果
1 MTS實(shí)驗(yàn)表明姜黃素處理MCF-7、MCF-7/DOX細(xì)胞后,兩種細(xì)胞的增殖均減弱,且細(xì)胞對(duì)阿霉素的敏感性顯著增高。
2 RT-PCR結(jié)果顯示姜黃素促進(jìn)兩種細(xì)胞MDR1 mRNA的表達(dá), Western blot結(jié)果顯示
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