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文檔簡介
1、目的:通過觀察腦出血(ICH)急性期大鼠腦組織中血腫周圍腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor,TNF-α)的表達、血清白細胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白細胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量及神經功能的變化,探討中藥逐痰通絡湯對腦出血急性期大鼠損傷的作用及可能機制。
方法:清潔級雄性SD大鼠116只,隨機分為正常對照組(N組,n=6)、假手術組(K組,
2、n=30)、模型組(C組,n=40)和給藥組(Z組,n=40),對照組6只,后3組設術后6 h、24h、48 h、72 h、7d共5個時間點,各時間點8只大鼠(K組各時間點6只)。選用大黃、膽南星、地龍、全蝎、天麻、郁金、石菖蒲、天竹黃組成“逐痰通絡湯”,中藥水煎濃縮為1.15g/ml。采用膠原酶誘導法定位于腦尾狀核建立大鼠腦出血模型,給藥組于造模后6h、24h、48h、72h、7d,5個時間點給予逐痰通絡湯灌胃,(大鼠灌胃量每次1ml
3、,每天2次),假手術組、模型組給予等量生理鹽水,正常組按常規(guī)飼養(yǎng)。造模后3h待大鼠清醒后采用Bederson[1】6級5分法進行神經功能評分,取評分為1-4級分的入組。在指定的時間點神經功能評分后2h(即給藥組灌胃后2h),用3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉后,直視下行左心室穿刺抽血,制備血清;心臟灌注后斷頭取腦,做標本待用。參考Bederson[1】6級5分法進行神經功能評分,免疫組化染色SABC法檢測腦組織中血腫周圍TNF-α的表達,用E
4、LISA法檢測血清IL-1β、IL-6的含量。
結果:
①神經功能評分:除假手術組之外,其余各組大鼠麻醉清醒之后均出現(xiàn)一定程度的神經功能缺損癥狀。腦出血后第6h評分已較高,第1d、2d評分逐漸上升,第3d評分達到高峰,第7d降到最低值。Z組與C組比較,Z組評分均較低,第6h、1d及2d無明顯統(tǒng)計學差異,第3d、7d有差異(P<0.05)。
②腦組織TNF-α陽性表達:TNF-α陽性細胞胞漿染色呈
5、棕黃色。TNF-α陽性細胞集中分布在出血區(qū)尾狀核腦組織,在術后2d大量表達,第3d達到最高值,第7d明顯下降,但仍高于正常值;K組各時間點比較無統(tǒng)計學差異;C組與K組比較,6h、第1d無統(tǒng)計學差異,第2d、3d及7d均有統(tǒng)計學差異(P<0.01);Z組與C組比較,TNF-α值在6h、1d沒有顯著差異,給藥2d后有差異,3d及7d后差異顯著(P<0.01)。
③IL-1β、IL-6測定結果:
1、共同點:(A)
6、與K組比較,C組IL-1β、IL-6含量在第1d時開始升高(P<0.05),第2、3d到達高值(P<0.001),第7d接近正常范圍;(B)給藥后,第2d,Z組IL-1β、IL-6含量較C組明顯下降(P<0.05),第3d,顯著下降(P<0.001)。
2、不同點:在C組內,均與6h時間點比較,(A)IL-1β的表達,第2d、3d差異顯著(P<0.001),第1d、7d無統(tǒng)計學差異;(B)IL-6的表達,第1d即有差異,第
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