肝再生磷酸酶-3對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后的影響.pdf

1、實(shí)驗(yàn)一 肝再生磷酸酶-3對(duì)浸潤(rùn)性乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后的影響 轉(zhuǎn)移不僅是惡性腫瘤的基本生物學(xué)特征，它也是評(píng)估腫瘤臨床預(yù)后的重要因素。因此，腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制的研究將為臨床上控制腫瘤的發(fā)生發(fā)展提供理論基礎(chǔ)，在腫瘤的防治方面具有極其重要的意義。近年來(lái)隨著分子生物學(xué)，細(xì)胞生物學(xué)的快速發(fā)展，新的技術(shù)手段廣泛應(yīng)用于腫瘤轉(zhuǎn)移的研究，使人們對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制有了更加深入的了解?，F(xiàn)已得知，乳腺癌的轉(zhuǎn)移是一個(gè)多基因參與通過(guò)多步驟完成的復(fù)雜過(guò)程，涉及腫

2、瘤細(xì)胞自身生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)的獲得；細(xì)胞間豁附能力的降低；癌細(xì)胞對(duì)細(xì)胞外間質(zhì)和基底膜的降解與破壞；細(xì)胞骨架重構(gòu)引起細(xì)胞運(yùn)動(dòng)與遷移；細(xì)胞因子誘導(dǎo)的癌細(xì)胞器官特異性定向歸巢；以及腫瘤血管和淋巴管生成，癌細(xì)胞逃逸凋亡和免疫殺傷等諸多因素，而且這些因素是互相關(guān)聯(lián)和相互影響的。乳腺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移不能用單機(jī)理闡述，因此，檢測(cè)相關(guān)基因在乳腺癌中的表達(dá)有助于尋找合適的能夠預(yù)測(cè)乳腺癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的腫瘤生物學(xué)行為的指標(biāo)。另一方面腫瘤在進(jìn)展的過(guò)程中有異質(zhì)性改變，乳腺原發(fā)

3、癌中只有不足1％的癌細(xì)胞具有最終形成轉(zhuǎn)移灶的能力，只有獲得明顯生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)的癌細(xì)胞才能完成浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程，從而在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中表現(xiàn)為某些生物學(xué)行為的改變。因此，尋找影響轉(zhuǎn)移各個(gè)步驟及各有關(guān)表型的調(diào)控點(diǎn)或觸發(fā)點(diǎn)，是探明腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控機(jī)制的關(guān)鍵，檢測(cè)原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶相關(guān)指標(biāo)的表達(dá)差異亦有助于揭示乳腺癌浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制和調(diào)控機(jī)理。 腫瘤的轉(zhuǎn)移主要包括血道轉(zhuǎn)移和淋巴道轉(zhuǎn)移。長(zhǎng)期以來(lái)，由于血管形成在實(shí)體腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的重要作用，一些學(xué)者把研究

4、的焦點(diǎn)集中在血管形成與腫瘤增殖侵襲、轉(zhuǎn)移的關(guān)系上，而忽略了對(duì)腫瘤淋巴管的研究。隨著對(duì)淋巴管認(rèn)識(shí)的加深，腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的研究也越來(lái)越深入。腫瘤微淋巴管的生成在腫瘤淋巴結(jié)侵襲轉(zhuǎn)移發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用已被部分研究人員所認(rèn)識(shí)。他們認(rèn)為淋巴管因其結(jié)構(gòu)和功能的特征，不僅參與維持腫瘤的生長(zhǎng)，而且是多種惡性腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散的主要途徑，尤其在淋巴管豐富的器官中表現(xiàn)更為突出。1994年，自從發(fā)現(xiàn)PRL-3以來(lái)，PRL-3被發(fā)現(xiàn)在人類多種實(shí)體腫瘤組織中高表達(dá)，而

5、且與腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。PRL-3可刺激腫瘤淋巴管的生成且可能參與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)研究正成為腫瘤研究的一個(gè)熱點(diǎn)。 乳腺癌是女性最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，已占我國(guó)城市女性惡性腫瘤發(fā)病率的第一位。其主要通過(guò)淋巴道轉(zhuǎn)移，研究證實(shí)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否是評(píng)估乳腺癌臨床預(yù)后的重要因素。乳腺富含淋巴管網(wǎng)，乳腺癌的早期即可經(jīng)過(guò)淋巴道發(fā)生轉(zhuǎn)移的特性為我們研究腫瘤的轉(zhuǎn)移提供的很好的材料。本研究旨在檢測(cè)乳腺癌組織中PRL-3的表達(dá)情況，探討PRL

6、-3的表達(dá)與乳腺癌臨床病理學(xué)特征和預(yù)后的關(guān)系，進(jìn)一步研究乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機(jī)制，進(jìn)而為乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的防治提供新的理論依據(jù)。 目的： 探討肝再生磷酸酶-3(PRL-3)在人浸潤(rùn)性乳腺癌組織中的表達(dá)情況及其與臨床病理學(xué)指標(biāo)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系。 方法： 應(yīng)用免疫組化二步法(Envision二步法)檢測(cè)82例浸潤(rùn)性乳腺癌組織PRL-3蛋白的表達(dá)，結(jié)合臨床病理資料和隨訪資料進(jìn)行分析。應(yīng)用SPSS13.0

7、統(tǒng)計(jì)軟件包分析，計(jì)數(shù)資料采用x2或McNemar's x2檢驗(yàn)，生存分析采用Kaplan-Meier曲線法并用Log-rank檢驗(yàn)；并用Cox回歸模型的單因素和多因素分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。 結(jié)果： 1、PRL-3的表達(dá)情況：PRL-3陽(yáng)性表達(dá)物質(zhì)呈棕黃色顆粒狀，彌漫性或局灶性分布于細(xì)胞胞漿內(nèi)，浸潤(rùn)性乳腺癌組織中PRL-3蛋白的表達(dá)率為70.7％，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移原發(fā)灶的表達(dá)率為77.8％，明顯高于無(wú)

8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移原發(fā)灶47.4％，兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=6.521，P=0.011；OR=3.889，95％ CI=1.322-11.438)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中PRL-3的表達(dá)率為95.2％。明顯高于對(duì)應(yīng)原發(fā)灶77.8％。 2、兩者之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.003)。而PRL-3表達(dá)與年齡(P=0.585)，腫瘤大小(P=0.335)，臨床分期(P=0.498)，ER狀態(tài)(P=0.279)，PR狀態(tài)(P=0.220)和Her-2狀

9、態(tài)(P=0.700)無(wú)相關(guān)性，P值均大于0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 3、經(jīng)Kaplan-Meier生存曲線分析，PRL-3蛋白的高表達(dá)與無(wú)復(fù)發(fā)生存率(P=0.024)及總生存率(P=0.033，)呈負(fù)相關(guān)。用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型對(duì)各臨床病理指標(biāo)進(jìn)行多因素分析，臨床分期(P=0.007)、Her-2(P=0.040)是總生存率的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子。而PRL-3表達(dá)(P=0.040)，Her-2(P=0.006)，和臨床分期(P=0.02

10、8)是無(wú)復(fù)發(fā)存率的獨(dú)立風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)因子。 結(jié)論： 1、PRL-3蛋白的高表達(dá)與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，可作為預(yù)測(cè)乳腺癌是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的分子標(biāo)志物。 2、PRL-3蛋白的表達(dá)與患者的無(wú)病生存率和總生存率密切相關(guān)，有望成為評(píng)估乳腺癌預(yù)后特別是復(fù)發(fā)新的分子生物學(xué)指標(biāo)。 實(shí)驗(yàn)二 肝再生磷酸酶-3基因在浸潤(rùn)性乳腺癌中擴(kuò)增的意義 目的：檢測(cè)浸潤(rùn)性乳腺癌患者腫瘤標(biāo)本組織中PRL-3mRNA的擴(kuò)增水平，分析它

11、與乳腺癌患者臨床病理學(xué)特征的關(guān)系。探討PRL-3mRNA擴(kuò)增對(duì)乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的判斷價(jià)值。 方法：應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)的逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法檢測(cè)45例浸潤(rùn)性乳腺癌組織、15例癌旁組織、20例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶、15例乳腺纖維腺瘤共95例新鮮標(biāo)本的PRL-3mRNA的表達(dá)水平，收集臨床資料，病理學(xué)免疫組化檢查ER、PR、Her-2結(jié)果進(jìn)行臨床分析。 結(jié)果：乳腺癌原發(fā)灶組織中的PRL-3mRNA的表達(dá)水平較癌旁正常組織、纖維

12、腺瘤組織明顯升高，45例新鮮乳腺癌組織中PRL-3基因表達(dá)量(0.741±0.198)較相應(yīng)正常乳腺組織(0.451±0.166)高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=5.101，P=0.000)；15例纖維腺瘤組織中PRL-3基因表達(dá)量(0.562±0.157)也低于乳腺癌原發(fā)灶，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.561，P=0.001)；20例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達(dá)水平也顯著高于其對(duì)應(yīng)的原發(fā)灶(0.961±0.110 vs0.842±0.191，P=0.