肝再生磷酸酶-3對乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預后的影響.pdf

1、實驗一 肝再生磷酸酶-3對浸潤性乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預后的影響 轉(zhuǎn)移不僅是惡性腫瘤的基本生物學特征，它也是評估腫瘤臨床預后的重要因素。因此，腫瘤轉(zhuǎn)移機制的研究將為臨床上控制腫瘤的發(fā)生發(fā)展提供理論基礎，在腫瘤的防治方面具有極其重要的意義。近年來隨著分子生物學，細胞生物學的快速發(fā)展，新的技術(shù)手段廣泛應用于腫瘤轉(zhuǎn)移的研究，使人們對腫瘤轉(zhuǎn)移的分子機制有了更加深入的了解?，F(xiàn)已得知，乳腺癌的轉(zhuǎn)移是一個多基因參與通過多步驟完成的復雜過程，涉及腫

2、瘤細胞自身生長優(yōu)勢的獲得；細胞間豁附能力的降低；癌細胞對細胞外間質(zhì)和基底膜的降解與破壞；細胞骨架重構(gòu)引起細胞運動與遷移；細胞因子誘導的癌細胞器官特異性定向歸巢；以及腫瘤血管和淋巴管生成，癌細胞逃逸凋亡和免疫殺傷等諸多因素，而且這些因素是互相關聯(lián)和相互影響的。乳腺癌的侵襲、轉(zhuǎn)移不能用單機理闡述，因此，檢測相關基因在乳腺癌中的表達有助于尋找合適的能夠預測乳腺癌浸潤、轉(zhuǎn)移的腫瘤生物學行為的指標。另一方面腫瘤在進展的過程中有異質(zhì)性改變，乳腺原發(fā)

3、癌中只有不足1％的癌細胞具有最終形成轉(zhuǎn)移灶的能力，只有獲得明顯生長優(yōu)勢的癌細胞才能完成浸潤轉(zhuǎn)移過程，從而在腫瘤進展過程中表現(xiàn)為某些生物學行為的改變。因此，尋找影響轉(zhuǎn)移各個步驟及各有關表型的調(diào)控點或觸發(fā)點，是探明腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控機制的關鍵，檢測原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移灶相關指標的表達差異亦有助于揭示乳腺癌浸潤、轉(zhuǎn)移的分子機制和調(diào)控機理。 腫瘤的轉(zhuǎn)移主要包括血道轉(zhuǎn)移和淋巴道轉(zhuǎn)移。長期以來，由于血管形成在實體腫瘤發(fā)生和發(fā)展中的重要作用，一些學者把研究

4、的焦點集中在血管形成與腫瘤增殖侵襲、轉(zhuǎn)移的關系上，而忽略了對腫瘤淋巴管的研究。隨著對淋巴管認識的加深，腫瘤淋巴道轉(zhuǎn)移的研究也越來越深入。腫瘤微淋巴管的生成在腫瘤淋巴結(jié)侵襲轉(zhuǎn)移發(fā)生發(fā)展過程中的作用已被部分研究人員所認識。他們認為淋巴管因其結(jié)構(gòu)和功能的特征，不僅參與維持腫瘤的生長，而且是多種惡性腫瘤細胞擴散的主要途徑，尤其在淋巴管豐富的器官中表現(xiàn)更為突出。1994年，自從發(fā)現(xiàn)PRL-3以來，PRL-3被發(fā)現(xiàn)在人類多種實體腫瘤組織中高表達，而

5、且與腫瘤細胞的增殖和轉(zhuǎn)移關系密切。PRL-3可刺激腫瘤淋巴管的生成且可能參與腫瘤淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關研究正成為腫瘤研究的一個熱點。 乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一，已占我國城市女性惡性腫瘤發(fā)病率的第一位。其主要通過淋巴道轉(zhuǎn)移，研究證實淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否是評估乳腺癌臨床預后的重要因素。乳腺富含淋巴管網(wǎng)，乳腺癌的早期即可經(jīng)過淋巴道發(fā)生轉(zhuǎn)移的特性為我們研究腫瘤的轉(zhuǎn)移提供的很好的材料。本研究旨在檢測乳腺癌組織中PRL-3的表達情況，探討PRL

6、-3的表達與乳腺癌臨床病理學特征和預后的關系，進一步研究乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的機制，進而為乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的防治提供新的理論依據(jù)。 目的： 探討肝再生磷酸酶-3(PRL-3)在人浸潤性乳腺癌組織中的表達情況及其與臨床病理學指標，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預后的關系。 方法： 應用免疫組化二步法(Envision二步法)檢測82例浸潤性乳腺癌組織PRL-3蛋白的表達，結(jié)合臨床病理資料和隨訪資料進行分析。應用SPSS13.0

7、統(tǒng)計軟件包分析，計數(shù)資料采用x2或McNemar's x2檢驗，生存分析采用Kaplan-Meier曲線法并用Log-rank檢驗；并用Cox回歸模型的單因素和多因素分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義的標準。 結(jié)果： 1、PRL-3的表達情況：PRL-3陽性表達物質(zhì)呈棕黃色顆粒狀，彌漫性或局灶性分布于細胞胞漿內(nèi)，浸潤性乳腺癌組織中PRL-3蛋白的表達率為70.7％，其中伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移原發(fā)灶的表達率為77.8％，明顯高于無

8、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移原發(fā)灶47.4％，兩者之間有統(tǒng)計學意義(x2=6.521，P=0.011；OR=3.889，95％ CI=1.322-11.438)；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中PRL-3的表達率為95.2％。明顯高于對應原發(fā)灶77.8％。 2、兩者之間有統(tǒng)計學意義(P=0.003)。而PRL-3表達與年齡(P=0.585)，腫瘤大小(P=0.335)，臨床分期(P=0.498)，ER狀態(tài)(P=0.279)，PR狀態(tài)(P=0.220)和Her-2狀

9、態(tài)(P=0.700)無相關性，P值均大于0.05，無統(tǒng)計學意義。 3、經(jīng)Kaplan-Meier生存曲線分析，PRL-3蛋白的高表達與無復發(fā)生存率(P=0.024)及總生存率(P=0.033，)呈負相關。用Cox比例風險模型對各臨床病理指標進行多因素分析，臨床分期(P=0.007)、Her-2(P=0.040)是總生存率的獨立風險預測因子。而PRL-3表達(P=0.040)，Her-2(P=0.006)，和臨床分期(P=0.02

10、8)是無復發(fā)存率的獨立風險預測因子。 結(jié)論： 1、PRL-3蛋白的高表達與乳腺癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關，可作為預測乳腺癌是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的分子標志物。 2、PRL-3蛋白的表達與患者的無病生存率和總生存率密切相關，有望成為評估乳腺癌預后特別是復發(fā)新的分子生物學指標。 實驗二 肝再生磷酸酶-3基因在浸潤性乳腺癌中擴增的意義 目的：檢測浸潤性乳腺癌患者腫瘤標本組織中PRL-3mRNA的擴增水平，分析它

11、與乳腺癌患者臨床病理學特征的關系。探討PRL-3mRNA擴增對乳腺癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的判斷價值。 方法：應用標準的逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)方法檢測45例浸潤性乳腺癌組織、15例癌旁組織、20例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶、15例乳腺纖維腺瘤共95例新鮮標本的PRL-3mRNA的表達水平，收集臨床資料，病理學免疫組化檢查ER、PR、Her-2結(jié)果進行臨床分析。 結(jié)果：乳腺癌原發(fā)灶組織中的PRL-3mRNA的表達水平較癌旁正常組織、纖維

12、腺瘤組織明顯升高，45例新鮮乳腺癌組織中PRL-3基因表達量(0.741±0.198)較相應正常乳腺組織(0.451±0.166)高，差異有統(tǒng)計學意義(t=5.101，P=0.000)；15例纖維腺瘤組織中PRL-3基因表達量(0.562±0.157)也低于乳腺癌原發(fā)灶，差異有統(tǒng)計學意義(t=3.561，P=0.001)；20例淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶中的表達水平也顯著高于其對應的原發(fā)灶(0.961±0.110 vs0.842±0.191，P=0.