2型糖尿病亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化與CD36、SRB1基因的關(guān)系.pdf

1、研究背景：亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化(subclinical atherosclerosis)是動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis AS)的早期階段，指患者無(wú)臨床癥狀，但彩色B超證實(shí)頸總動(dòng)脈、股動(dòng)脈或髂總動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度≥1.0mm和/或有動(dòng)脈粥樣硬化斑塊出現(xiàn)。2型糖尿病(T2DM)多因素干預(yù)的主要目的之一是預(yù)防亞臨床AS的發(fā)生發(fā)展。B類清道夫受體(scavenger receptor class B,Scarb,SRB)是LDL-c、

2、HDL-c代謝中的重要受體蛋白，包括CD36和B類清道夫受體BI(scavenger receptorclass B type I，Scarbl，SRB1)兩種。CD36抗原是一種細(xì)胞膜糖蛋白，存在多種配體(如氧化的和乙?；腖DL-c等)，參與包括脂質(zhì)代謝和動(dòng)脈粥樣硬化在內(nèi)的許多生理和病理過(guò)程。SRB1是CD36蛋白家族成員，與CD36共享30％的同源序列，為脂蛋白受體中唯一能真正介導(dǎo)細(xì)胞與HDL-c作用的膜受體。 研究目的：

3、對(duì)新診2型糖尿病進(jìn)行4年的多因素干預(yù)，了解代謝控制狀況及亞臨床AS的發(fā)生情況；通過(guò)檢測(cè)CD36、SRB1基因多態(tài)性、外周血單核細(xì)胞表面CD36表達(dá)情況，分析它們與T2DM患者代謝水平及亞臨床AS進(jìn)程的關(guān)系。 第一部分新診2型糖尿病亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化的前瞻性多因素干預(yù) 研究目的：探討不同方案干預(yù)下新診斷2型糖尿病(T2DM)患者的代謝指標(biāo)控制及亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化(AS)發(fā)生和發(fā)展的情況。 方法：采用前瞻性開放研究，將

4、170例(35-70歲)病程1年以內(nèi)、無(wú)AS的新診T2DM患者按隨機(jī)數(shù)字表法分為四組，分別為：A組(強(qiáng)化降糖+降壓治療)、B組(強(qiáng)化降糖+降壓+調(diào)脂治療)、C組(在B組基礎(chǔ)上加服維生素E0.2g/天)及D組(在B組基礎(chǔ)上加服復(fù)方丹參滴丸30丸/天)。共觀察4年，每月隨訪一次，定期復(fù)查空腹血糖(FBS)、餐后2小時(shí)血糖(PBS)、糖化血紅蛋白(HbAlc)、血脂、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)、體重指數(shù)(BMI)、腰臀比(WHR)和血

5、管彩超，了解干預(yù)4年的代謝控制情況及其頸總動(dòng)脈(CCA)、股動(dòng)脈(FIA)內(nèi)中膜厚度(IMT)和/或AS斑塊發(fā)生的進(jìn)展。 結(jié)果：①170例患者中，實(shí)際完成4年多因素干預(yù)共149例，失訪21例(脫失率12.4％)。②干預(yù)4年結(jié)束時(shí)，149例患者HbAlc、甘油三酯(TG)、總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-c)、SBP、DBP水平均較基線顯著下降(p<0.01)；WHR、HbAlc、TG、TC、LDL-c、SBP、DBP達(dá)標(biāo)

6、率分別為29.5％、54.4％、74.5％、71.1％、73.8％、98.0％和98.7％，較基線顯著提高(p<0.01)；⑧共有88例發(fā)生亞臨床AS，發(fā)生率達(dá)59.1％；A、B、C、D四組患者亞臨床AS發(fā)生率分別為69.4％、53.8％、62.2％、51.4％，各組間比較p>0.05；④A、B、C、D四組CCA-IMT、FA-IMT均較基線增加，各組與基線比較p均<0.01； B、C、D三組干預(yù)4年后低密度脂蛋白(LDL-c)、膽固醇

7、(TC)顯著低于A組(p分別為<0.01、<0.05)。 結(jié)論：多因素強(qiáng)化干預(yù)盡管可使T2DM患者代謝狀況得到很大改善，WHR、HbAlc、TG、TC、LDL-c、SBP、DBP達(dá)標(biāo)率顯著提高，但不能完全阻止大血管病變的發(fā)生，隨著病程的增加，亞臨床AS呈進(jìn)展趨勢(shì)。 第二部分清道夫受體B(CD36、及SRB1)基因多態(tài)性與2型糖尿病及其亞臨床動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程的關(guān)系 目的：探討清道夫受體B基因(CD36及SRB1基因

8、)多態(tài)性與多因素干預(yù)下T2DM亞臨床AS發(fā)生的關(guān)系。 方法：采用PCR-RFLP方法檢測(cè)470例湖南地區(qū)漢族T2DM患者及220例無(wú)糖尿病對(duì)照組CD36(CD36-rsl984112、CD36-T620C位點(diǎn))及SRB1-rs5888基因多態(tài)性，比較它們基因型及等位基因頻率的差異。采用logistic回歸模型分析CD36-1984112及SRB1-rs5888基因型及代謝指標(biāo)對(duì)亞臨床AS的影響，預(yù)測(cè)多因素干預(yù)下發(fā)生亞臨床AS的影

9、響因素。 結(jié)果：①T2DM患者與健康受試者CD36(CD36-rsl984112位點(diǎn)、CD36-T620C位點(diǎn))基因型及等位基因頻率比較均無(wú)顯著性差異(p>0.05)；SRB1基因型及等位基因頻率在T2DM與對(duì)照組間比較差異有顯著性(p<0.01)，T2DM患者攜帶SRB1-rs5888C/C基因型的頻率低于健康人群(46.6％VS 63.2％，p<0.01)，攜帶SRB1-C/T的頻率高于健康人群(43.4％vs 30.5％，

10、p<0.01)，T2DM患者攜帶等位基因T的頻率高于健康人群(31.7％VS 24.5％，p<0.01)；②將所有攜帶CD36-rsl9841 12A/A和/或SRBl-rs5888T/T的單倍體型1、2、3、6、9合并為一類(單倍體型A)，其他的單倍體型4、5、7、8合并為一類(單倍體型B)，兩者比較單倍體型A亞臨床AS的發(fā)病率較B為高(65.4％VS 52.1％，p=0.133)；③以亞臨床AS是否發(fā)生(0、1)為因變量做logis

11、tic回歸分析顯示，多因素干預(yù)下影響亞臨床AS發(fā)生的因素有3個(gè)：年齡(OR值1.103)、LDL-c(OR值2.552)、吸煙(OR值2.242)，CD36與SRB1基因型及其交互作用、其他代謝指標(biāo)均未進(jìn)入logistic回歸模型。 結(jié)論：①SRBl-rs5888基因型及等位基因頻率在T2DM患者與健康受試者中分布不同，T2DM患者攜帶SRB1等位基因T的頻率高于健康人群。②多因素干預(yù)下，除年齡外，LDL-c和吸煙是亞臨床AS發(fā)

12、生的主要危險(xiǎn)因素，CD36及SRB1基因多態(tài)性可能與亞臨床AS進(jìn)程無(wú)關(guān)。 第三部分 2型糖尿病單核細(xì)胞表面清道夫受體CD36的表達(dá)及其影響因素的分析 目的：了解2型糖尿病患者外周血單核細(xì)胞表面CD36的表達(dá)情況，探討影響CD36表達(dá)的有關(guān)因素及CD36表達(dá)與亞臨床AS的關(guān)系。 方法：采用PCR-RFLP方法檢測(cè)102例湖南地區(qū)漢族T2DM患者和8例健康受試者CD36-1984112及SRB1-rs5888基因多態(tài)

13、性，采用密度梯度離心法分離T2DM患者和健康受試者外周血單個(gè)核細(xì)胞，流式細(xì)胞儀檢測(cè)單核細(xì)胞表面CD36蛋白表達(dá)熒光強(qiáng)度，比較T2DM無(wú)AS組、T2DM亞臨床AS組及健康對(duì)照組CD36的表達(dá)。多元線性回歸分析CD36表達(dá)的影響因素。Logistic回歸分析多因素干預(yù)下亞臨床AS與CD36表達(dá)的關(guān)系。 結(jié)果：T2DM亞臨床AS組外周血單核細(xì)胞CD36的平均熒光強(qiáng)度(MFI)高于T2DM無(wú)AS組(1382.23±658.69 vs 1

14、173.02±339.71道數(shù)，p=0.047)。CD36高表達(dá)組SBP較低表達(dá)組為低，p=0.020，校正年齡后，p=0.010。多元線性回歸分析顯示，影響T2DM患者CD36表達(dá)的因素有：年齡(p=0.005)、性別(p=0.021)、SBP(p=0.027)，標(biāo)化偏回歸系數(shù)分別為0.28、0.3 1、-0.21；男、女性T2DM患者分別做多元線性回歸分析，影響男性CD36表達(dá)的因素為年齡(p=0.002)；影響女性CD36表達(dá)的因

15、素為DBP(p=0.001)。以是否存在亞臨床AS(0、1)為因變量，以CD36單核細(xì)胞表面表達(dá)的熒光強(qiáng)度等指標(biāo)作為自變量做logistic回歸，留在方程的因素是年齡(p=0.004)、LDL-c(p=0.095)，CD36-MFI未進(jìn)入方程。 結(jié)論：①T2DM亞臨床AS組外周血單核細(xì)胞表面CD36表達(dá)較無(wú)AS組高。②年齡、性別、SBP是CD36表達(dá)的影響因素，增齡、男性、低的SBP可使CD36表達(dá)增加；影響男性CD36表達(dá)的主