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
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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:機(jī)體的免疫系統(tǒng)是一個(gè)精密的反應(yīng)體系,免疫應(yīng)答的觸發(fā)、進(jìn)展和平息受到免疫系統(tǒng)的精確調(diào)控。免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)機(jī)制研究是免疫學(xué)研究的重要分支,機(jī)體各器官微環(huán)境對(duì)免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)作用不容忽視。免疫應(yīng)答的主體是免疫細(xì)胞,而樹突狀細(xì)胞(dendritic cells,DC)作為專職抗原提呈細(xì)胞是免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),因此研究機(jī)體器官微環(huán)境對(duì)樹突狀細(xì)胞生物學(xué)功能的影響具有重要理論價(jià)值和臨床意義。正常妊娠是一個(gè)復(fù)雜的生理過(guò)程,母體的免疫系統(tǒng)不排斥同種異基
2、因移植物的胚胎,且保護(hù)胚胎正常發(fā)育直至分娩,是機(jī)體免疫耐受建立的體現(xiàn),說(shuō)明母體對(duì)胚胎存在著精細(xì)的免疫應(yīng)答和免疫調(diào)控機(jī)制,母胎耐受(maternal-fetal tolerance)的建立和維持是多種機(jī)制共同參與、互相制約、互相協(xié)調(diào)的動(dòng)態(tài)平衡過(guò)程。本研究建立小鼠子宮蛻膜基質(zhì)細(xì)胞(decidual stroma cells,DSC)和小鼠骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞的細(xì)胞共培養(yǎng)體系,探討子宮蛻膜基質(zhì)細(xì)胞對(duì)樹突狀細(xì)胞增殖的影響。
方法:應(yīng)用
3、白細(xì)胞介素-4(IL-4)和粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)誘導(dǎo)小鼠的骨髓細(xì)胞分化為樹突狀細(xì)胞,利用流式細(xì)胞儀(FACS)檢測(cè)細(xì)胞表面分子和細(xì)胞增殖,利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)其分泌的細(xì)胞因子,構(gòu)建小鼠子宮蛻膜細(xì)胞和小鼠骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞共培養(yǎng)體系模型,動(dòng)態(tài)觀察小鼠子宮蛻膜細(xì)胞和小鼠骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞增殖的影響。
結(jié)果:小鼠骨髓來(lái)源樹突狀細(xì)胞高表達(dá)CD11c,共刺激分子CD80和CD86,MHCⅡ類
4、分子Ia和MHCⅠ類分子H-2Kb。經(jīng)脂多糖(LPS)刺激的樹突狀細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-12(p70)、IL-6、TNFα和IL-1β的水平明顯上調(diào)(P<0.05),并能夠促進(jìn)抗原肽特異性T淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)能力(P<0.05)。在小鼠子宮蛻膜細(xì)胞和小鼠骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞共培養(yǎng)10天后觀察到小鼠子宮蛻膜細(xì)胞明顯促進(jìn)小鼠骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞增殖。
結(jié)論:成功構(gòu)建小鼠子宮蛻膜基質(zhì)細(xì)胞和小鼠骨髓來(lái)源的樹突狀細(xì)胞共培養(yǎng)體系。驗(yàn)證了樹突
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