過氧化物酶體增殖體激活體受體γ（PPARγ）激動(dòng)劑的抗動(dòng)脈粥樣硬化機(jī)制研究.pdf

1、目的：過氧化物酶體增殖體激活體受體(PPARr)激動(dòng)劑能抑制ApoE基因剔除的雄性小鼠的動(dòng)脈粥樣硬化的形成，但其機(jī)制仍未完全明了，本研究通過PPARγ激動(dòng)劑羅格列酮對(duì)高膽固醇血癥兔的腹主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的干預(yù)來探討PPARγ激動(dòng)劑對(duì)一氧化氮合酶(NOS)，基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)和β-鈣聯(lián)蛋白(β-catenin)的調(diào)控。 方法：(1)建立動(dòng)物模型和分組：對(duì)照組(A組)6只兔予以正常飼料，其余各組喂高脂飼料，2周后行腹主動(dòng)脈拉

2、傷術(shù)，術(shù)后繼續(xù)每日喂高脂飼料4周，同時(shí)分為模型組(B組，6只)；阿托伐他汀組加用阿托伐他汀5mg/kg(C組，6只)；羅格列酮組加用羅格列酮3mg/kg(D組，6只)；聯(lián)合用藥組(羅格列酮3mg/kg和阿托伐他汀組5mg/kg(E組，6只)。(2)術(shù)前和至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)取各組兔的經(jīng)耳中央動(dòng)脈采血，采用氧化酶法檢測(cè)血清甘油三酯(TG)總膽固醇(TC)；實(shí)驗(yàn)結(jié)束后光鏡標(biāo)本測(cè)量血管壁的內(nèi)中膜厚度。(3)取100mg左右腹主動(dòng)脈組織加入9倍勻漿介質(zhì)

3、研磨后取上清液，用一氧化氮合酶分型試劑盒檢測(cè)eNOS和iNOS的活力。(4)采用Trizol-氯仿-異丙醇一步法提取兔的腹主動(dòng)脈組織的總RNA，純度檢測(cè)合格后，取總RNA做逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA,根據(jù)各對(duì)引物所需條件進(jìn)行PCR，PCR產(chǎn)物經(jīng)圖像分析系統(tǒng)掃描后半定量評(píng)價(jià)表達(dá)水平。將腹主動(dòng)脈剪成長(zhǎng)1mm于DMEM無血清培養(yǎng)24小時(shí)。取上清液，經(jīng)明膠酶譜法和逆酶譜法測(cè)定MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2的活性圖像掃描分析。(5)提示各組兔