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1、目的:通過(guò)體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法,觀察苦參堿(Mat)對(duì)體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞增生、PCNA表達(dá)及細(xì)胞周期的影響,并與治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的首選藥甲氨蝶呤(MTX)的作用進(jìn)行對(duì)比,為Mat治療RA提供實(shí)驗(yàn)室依據(jù)。 方法:用MTT比色法檢測(cè)不同劑量Mat和MTX對(duì)于Hela細(xì)胞增生水平的影響,用免疫組織化學(xué)法測(cè)定不同劑量組增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)水平,用碘化丙啶(PI)染色流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定各組細(xì)胞周期變化。 結(jié)果:
2、 ①M(fèi)at、MTX均可抑制體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞的生長(zhǎng),兩組細(xì)胞抑制率均隨濃度升高而增加,顯示Mat、MTX對(duì)體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞均具有增殖抑制作用,且均有時(shí)間、劑量依賴關(guān)系,與未加藥的對(duì)照組相比差異均有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但Mat與MTX組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ②不同處理組PCNA表達(dá)水平的比較發(fā)現(xiàn)Mat、MTX各濃度劑量組Hela細(xì)胞PCNA表達(dá)水平與未加藥的對(duì)照組相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,且隨著Mat、MTX濃度的增
3、加,平均吸光度值逐漸減少,提示藥物對(duì)PCNA的影響呈劑量依賴性。但Mat與MTX各組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果表明在所選濃度內(nèi),兩種藥物對(duì)Hela細(xì)胞PCNA表達(dá)水平的影響效應(yīng)基本相同,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 ③三水平Mat、MTX作用于Hela細(xì)胞,兩組間細(xì)胞周期及增殖指數(shù)(PI%)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;而兩組均與對(duì)照組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,可使Hela細(xì)胞S期細(xì)胞減少,G0/G1期細(xì)胞增多,即G0/G1→S期延緩,PI%較對(duì)照組下降
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