苦參堿與甲氨蝶呤對Hela細(xì)胞影響的對比研究.pdf

1、目的：通過體外細(xì)胞培養(yǎng)的方法，觀察苦參堿(Mat)對體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞增生、PCNA表達(dá)及細(xì)胞周期的影響，并與治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)的首選藥甲氨蝶呤(MTX)的作用進(jìn)行對比，為Mat治療RA提供實驗室依據(jù)。 方法：用MTT比色法檢測不同劑量Mat和MTX對于Hela細(xì)胞增生水平的影響，用免疫組織化學(xué)法測定不同劑量組增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)水平，用碘化丙啶(PI)染色流式細(xì)胞術(shù)測定各組細(xì)胞周期變化。 結(jié)果：

2、 ①Mat、MTX均可抑制體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞的生長，兩組細(xì)胞抑制率均隨濃度升高而增加，顯示Mat、MTX對體外培養(yǎng)的Hela細(xì)胞均具有增殖抑制作用，且均有時間、劑量依賴關(guān)系，與未加藥的對照組相比差異均有明顯的統(tǒng)計學(xué)意義，但Mat與MTX組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 ②不同處理組PCNA表達(dá)水平的比較發(fā)現(xiàn)Mat、MTX各濃度劑量組Hela細(xì)胞PCNA表達(dá)水平與未加藥的對照組相比差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，且隨著Mat、MTX濃度的增

3、加，平均吸光度值逐漸減少，提示藥物對PCNA的影響呈劑量依賴性。但Mat與MTX各組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果表明在所選濃度內(nèi)，兩種藥物對Hela細(xì)胞PCNA表達(dá)水平的影響效應(yīng)基本相同，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。 ③三水平Mat、MTX作用于Hela細(xì)胞，兩組間細(xì)胞周期及增殖指數(shù)(PI％)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；而兩組均與對照組差異有統(tǒng)計學(xué)意義，可使Hela細(xì)胞S期細(xì)胞減少，G0/G1期細(xì)胞增多，即G0/G1→S期延緩，PI％較對照組下降