中藥影響表皮葡萄球菌形成生物被膜關(guān)鍵基因的機(jī)制研究.pdf

1、目的：目前表皮葡萄球菌(Staphylococcus epidermidis Se.)已成為院內(nèi)感染的前四位病原體之一，研究發(fā)現(xiàn)生物被膜是該菌致病及感染難以治愈的主要原因，臨床一般是采用大劑量的抗生素治療此類感染，造成了目前該細(xì)菌對多數(shù)抗生素普遍存在耐藥性。中藥不易造成細(xì)菌耐藥，是我國新藥開發(fā)的優(yōu)勢所在。本實(shí)驗(yàn)擬篩選出影響Se.生物被膜的中藥單體，探討該藥物影響Se.形成生物被膜關(guān)鍵基因的機(jī)制，并用于I臨床菌株的研究。 方法：

2、 1.以生物被膜表型陽性的標(biāo)準(zhǔn)菌株Se.ATCC35984在體外構(gòu)建生物被膜模型，篩選出影響Se.生物被膜的中藥單體。 2.以生物被膜表型陽性的標(biāo)準(zhǔn)菌株Se.ATCC35984在體外構(gòu)建生物被膜模型，抗生素(萬古霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素)為對照藥物，采用熒光定量PCR的方法，研究中藥單體對標(biāo)準(zhǔn)菌株Se.ATCC35984形成生物被膜關(guān)鍵基因-icaA基因和agr基因表達(dá)的影響。 3.以臨床來源的Se.在體外構(gòu)建生物被

3、膜，抗生素(萬古霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素)為對照藥物，采用熒光定量PCR的方法檢測藥物作用前后icaA基因和agr基因表達(dá)，研究中藥單體對臨床分離株的生物被膜的影響。 結(jié)果： 1.從五倍子、黃連、黃芩、黃柏四種臨床常用的抗菌中藥及其有效單體中篩選出了影響Se.ATCC35984生物被膜的中藥單體--鹽酸小檗堿，系黃連的主要作用成分。 2.鹽酸小檗堿對Se.ATCC35984形成生物被膜icaA基因和agr基因的影響

4、作用不及抗生素(萬古霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素)；當(dāng)不同濃度的鹽酸小檗堿分別與抗生素(萬古霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素)聯(lián)用時(shí)，隨著鹽酸小檗堿的濃度增加，聯(lián)合用藥對icaA基因和agr基因的影響作用逐漸減弱。 3.從臨床收集到8株生物被膜陽性的Se.，對萬古霉素100％敏感，對紅霉素100％耐藥，對環(huán)丙沙星耐藥率為76％；鹽酸小檗堿對臨床菌株icaA基因和agr基因的影響弱于萬古霉素，優(yōu)于紅霉素和環(huán)丙沙星，尤其是紅霉素。 結(jié)論：

5、 1.鹽酸小檗堿做為臨床常用的一種抗菌中藥單體，對Se.生物被膜有一定的影響，其可能通過抑制Se.生物被膜關(guān)鍵基因--icaA基因和agr基因的表達(dá)而影響Se.生物被膜的形成。 2.鹽酸小檗堿對Se.形成生物被膜關(guān)鍵基因表達(dá)的抑制作用不及抗生素(萬古霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素)，并且不能與抗生素(萬古霉素、環(huán)丙沙星、紅霉素)聯(lián)合用藥，它們之間存在拮抗作用。 3.在治療Se.生物被膜引起的感染時(shí)，首先使用抗生素治療，但是