骨髓間充質(zhì)干細胞對博萊霉素致小鼠肺纖維化的影響及作用機制研究.pdf

1、目的：通過觀察骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSCs）對博來霉素致小鼠肺纖維化動物模型的影響，探討治療肺纖維化的新方法。 方法：體外分離、培養(yǎng)雄性6-8周C57BL/6J小鼠間充質(zhì)干細胞。60只6-8周雌性C57BL/6J小鼠隨機分為3組：陰性對照組（P組），陽性對照組（B組），BMSCs治療組（B+M組）。P組于氣管內(nèi)注入PBS50μL，B組及B+M組按5μg/g劑量氣管內(nèi)注入博萊霉素50μL制備肺纖維化模型，B+M組于造模后6h經(jīng)尾靜

2、脈注射BMSCs 1×107/mL，200μL。實驗第3，7，14，28天分別處死5只小鼠，收集小鼠肺泡灌洗液檢測其細胞因子IFN-γ、IL-4的濃度；留取肺組織行病理HE染色，羥脯氨酸含量測定，提取肺組織RNA以檢測TGF-β1mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4mRNA基因表達情況；提取肺組織的DNA檢測雄鼠的性別決定基因（sry基因）。 結(jié)果：1、肺臟組織病理：B+M組在第7、14天的肺泡炎較B組明顯減輕，第2

3、8天肺纖維化程度較B組明顯減輕。2、肺系數(shù)：B及B+M組各時間點肺系數(shù)均較P組稍高，但B+M組較B組明顯降低。3、HYP含量：在3、7天，三組的HYP含量無明顯差異；B+M組的HYP含量在第14天與P組相當，在28天稍高于P組，但均明顯低于B組。4、TGF-β1mRNA：B及B+M組各時間點TGF-β1mRNA表達均較P組高，但在后三個時間點B+M組明顯低于B組。5、sry基因檢測：B+M組各時間點均有雄性小鼠的sry基因存在。6、肺組

4、織IFN-γ mRNA、IL-4mRNA表達情況；B及B+M組IFN-γ mRNA、IL-4mRNA表達在四個時間點均明顯高于P組，在后三個時間點B+M組IFN-γ mRNA較B組明顯偏低，在后兩個時間點B+M組IL-4mRNA較B組明顯偏低；比較IL-4mRNA/IFN-γ mRNA，B+M組在后兩個時間點明顯低于B組。7、肺泡灌洗液中IFN-γ、IL-4的濃度：B及B+M組IFN-γ、IL-4濃度在四個時間點均高于P組，但在后三個時

5、間點B+M組IFN-γ濃度較B組明顯偏低；且其IL-4濃度在四個時間點均較B組明顯偏低；比較IL-4/IFN-γ濃度，B+M組在3，14，28天高于P組，在7、14、28天明顯低B組（7、14天：P<0.05；28天P=0.05）。 結(jié)論：1、外源性BMSCs經(jīng)尾靜脈注射可以到達肺損傷部位，且可以長期存在；2、外源性BMSCs可以減輕肺泡炎、肺纖維化的程度；3、外源性BMSCs發(fā)揮抗炎、抗纖維化的可能是通過逆轉(zhuǎn)Th1/Th2細胞