天然抗氧化劑對乳腺癌MCF-7-ADM細胞的耐藥逆轉作用及機制研究.pdf

1、目的：多藥耐藥(MDR)是導致腫瘤化療失敗的主要原因，從多種中藥單體或化合物中篩選高效低毒的腫瘤躲藥耐藥逆轉劑是逆轉耐藥的策略之一。本研究以人乳腺癌細胞敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM為模型，從白藜蘆醇(Res)、番茄紅素(Lyc)、原花青素(PC)、葉黃素(Lut)、丹皮酚(Pae)、橙皮苷(Hes)、和阿魏酸(Fera)等7種天然抗氧化成分中篩選腫瘤 MDR逆轉劑，并初步探討其耐藥逆轉活性及作用機制，為臨床上乳腺癌多藥

2、耐藥性的治療提供新的逆轉方法。
　　方法：(1)采用 MTT法對 Res、Lyc、PC、Lut、Pae、Hes和Fera七種抗氧化劑進行的細胞毒性及耐藥逆轉效果檢測；(2)采用 MTT法檢測葉黃素對敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM細胞的細胞毒性及耐藥逆轉作用；(3)采用激光共聚焦顯微鏡技術和流式細胞術檢測葉黃素對敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM細胞內(nèi)ADM蓄積的影響及細胞凋亡的變化。
　　結果：(

3、1)MCF-7/ADM細胞是人乳腺癌 MCF-7細胞經(jīng)阿霉素(ADM)選擇而建立的MDR細胞。本研究采用 MTT法，以MCF-7/ADM細胞為模型，對7種抗氧化劑進行體外篩選。結果表明，橙皮苷、丹皮酚在出現(xiàn)明顯細胞毒性劑量的情況下，仍未出現(xiàn)明顯的逆轉作用。白藜蘆醇2μg/ml，原花青素4μg/ml，番茄紅素40μg/ml，葉黃素20μg/ml，阿魏酸3μg/ml，對 ADM的耐藥倍數(shù)分別為1.28、1.27、1.43、1.39、1.09

4、。而在敏感株MCF-7細胞，除了番茄紅素，其他幾種藥物對ADM細胞毒性無明顯影響。(2)在敏感株MCF-7和耐藥株MCF-7/ADM細胞，測定不同濃度葉黃素與化療藥物合用時對腫瘤細胞的抑制作用，結果顯示隨著葉黃素濃度的逐漸增加，ADM及長春新堿(VCR)的細胞毒性性也逐漸增強。(3)ADM藥物蓄積實驗證明，葉黃素可劑量依賴性和時間依賴性的增加敏感株 MCF-7和耐藥株 MCF-7/ADM細胞內(nèi)阿霉素的蓄積量。細胞凋亡實驗表明，40μg/