bFGF對鞘內肌腱內源性愈合影響的組織學觀察.pdf

1、目的：肌腱損傷在骨科臨床工作中極其常見，特別是屈指肌腱，其術后愈合與粘連問題的解決一直是個難題。雖然盡力恢復其連續(xù)性，保持修復、吻合處平整、光滑，但絕大多數患者都須經過長時間的固定及二期肌腱松解來進一步恢復其功能，且功能恢復的程度仍不理想。多年來，人們對肌腱解剖、生理、病理及愈合過程進行了大量的臨床及實驗研究，探索了許多促進肌腱愈合和預防粘連的方法，取得了一定的成果，但是始終沒有一種效果確切而且操作簡單、成本低廉的方法能夠在臨床普遍推廣

2、。 堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)，是肝素結合型生長因子家族中的成員之一，是由146個氨基酸組成的多肽。已有研究證實，外源性bFGF既能促進肌腱愈合也加劇粘連程度，關鍵在于選擇什么樣的途徑或方法能夠揚長避短。這成為目前國內外研究的重點。本試驗通過將靜脈留置針置于肌腱斷端間，早期持續(xù)注入適量bFGF，干預肌腱的愈合過程。從組織學角度觀察其對肌腱內源性愈合的影響，以及比較愈合與粘連的進程。旨在為肌腱損傷后加速肌腱愈合的進程，使之

3、適于早期功能鍛煉提供理論依據。 方法：健康雄性萊亨雞78只，隨機分成3組。氯胺酮肌肉注射麻醉成功后，穩(wěn)妥固定于操作臺上，右膝關節(jié)以遠常規(guī)清洗、消毒、鋪巾。于第3趾近節(jié)與中節(jié)“∏”形切開皮膚分離皮下組織，打開A2-A4滑車之間的鞘管。制備趾深屈肌腱橫斷模型。A組近側端肌腱內縱行放置靜脈留置針，開口于斷端，以備斷端間給藥。B組鞘管內放置靜脈留置針，以備鞘管內給藥。C組原位縫合肌腱、自然愈合。三組均采用6-0無創(chuàng)傷縫合線行改良：Kes

4、sler縫合，間斷縫合修復鞘管。術后各組均用石膏固定雞爪成拳擊手套狀，各組動物回籠飼養(yǎng)，自由活動?？股貞?天，預防感染。自術后24小時起經留置針應用5.0ng/ml的bFGF，A組2μl/次、B組5μl/次。每12小時一次，連續(xù)8次，拔除留置針。于術后2、3、4、6周各組分別取6只雞，局麻下逐層解剖。行大體觀察，HE、Masson組織染色觀察，圖像分析，術后4周各組加取兩趾行掃描和透射電鏡觀察，對各組數據進行統計學分析。 結

5、果：大體觀察：術后2周，各組半透明膠凍樣物存在于斷端間及周圍，B組肌腱斷端周圍廣泛粘連，微紅色、較疏松的組織填充于腱鞘與肌腱之間，質脆；A、C兩組粘連程度相似較B組輕，B組斷端膠胨樣物質與A組相似，顏色較C組暗，堅韌度也強于C組。術后3周，吻合處梭形膨大的顏色有所加深，彈性增強，質較韌，粘連明顯加重，B組粘連范圍較大，鈍性分離較難，斷端連接牢固，肌腱滑動受限：A、C組僅梭形膨大處粘連，鈍性分離較B組容易；各組斷端膠胨樣物質顏色更渾濁，堅

6、韌度增強，C組相對較差。術后4周，B組肌腱致密粘連，粘連帶與3周時相似，須銳性分離。腱斷端被較牢固的纖維組織連接，暗灰色，質韌，彈性好；A、C組肌腱粘連范圍相似，愈合情況A組明顯好于C組。術后6周，肌腱粘連程度A、C兩組相似，較B組肌腱粘連程度輕。A、B組愈合質量相似，較C組好。 組織學觀察：A、B兩組斷端愈合情況表現相似。A、C兩組腱周圍粘連情況接近。術后2周，A組肌腱實質內成纖維細胞增生非?；钴S，可見大量新生膠原纖維和增生的

7、毛細血管，明顯多于腱周。B組腱實質內成纖維細胞及膠原纖維排列含量較A組稍差，腱周大量肉芽組織增生。C組成纖維細胞數量和新生膠原纖維量較少，排列紊亂，可見少量炎性細胞浸潤。術后3周，A組肌腱斷端由大量新生的形態(tài)和排列較規(guī)則的成纖維細胞和膠原纖維所連接。腱周和腱實質內細胞數量增加。毛細血管數量較前有所減少。B組腱實質與腱周的成纖維細胞及膠原纖維含量豐富，新生的膠原纖維和成纖維細胞連接斷端，膠原纖維排列較A組稍紊亂。C組大量成纖維細胞增生較活

8、躍，新生膠原纖維粗大、不均勻、排列較紊亂，縱橫交錯較嚴重。毛細血管明顯增生。術后4周，A、B組肌腱斷端愈合情況均較好，成纖維細胞增生旺盛，向腱細胞分化。膠原纖維均勻，排列規(guī)則。C組較差。B組粘連最重。術后6周A組愈合情況最好，可見斷端的膠原纖維基本融入腱實質，界限不明顯。毛細血管少見；B組腱內情況與A組接近，但肌腱與周圍組織的粘連嚴重；C組實質內成纖維細胞較多，腱細胞明顯較A、B組少，且分化稍不成熟。斷端膠原纖維豐富、不均勻、呈波浪狀、

9、排列趨于規(guī)則，自斷端向腱實質過度明顯。 圖像分析結果：術后各周腱實質內成纖維細胞數量和膠原纖維含量A組與B組之間差異無統計學意義P>0.05 A、B組與C組之間差異有統計學意義，量都大于C組，P<0.05；腱周A組與C組之間差異無統計學意義P>0.05；A、C組與B組之間差異有統計學意義P<0.05。 結論：損傷肌腱內縱行留置纖細的留置針，于肌腱斷端處早期滴注5.0ng/ml的外源性bFGF，可以有效的促進肌腱內源性愈合