新生大鼠缺血缺氧性腦損傷HSP70的合成及與細胞凋亡的關系.pdf

1、目的：利用新生大鼠缺血缺氧性腦損傷(hypoxic-ischemicbraindamageHIBD)動物模型，觀察缺血缺氧性腦損傷后不同時間腦細胞形態(tài)變化、HSP70的合成及細胞死亡形式，探討HIBD后HSP70的合成與細胞凋亡的關系，為缺血缺氧性腦病提供實驗和理論依據(jù)。 方法：7日齡SD大鼠48只，雌雄不限，體重12-18g，隨機分為空白對照組、假手術(shù)組和實驗組(缺血缺氧后2h、6h、18h、24h、48h、72h組)共8組，

2、每組各6只，實驗組動物采用阻斷右側(cè)頸總動脈后置于含8％O2的低氧環(huán)境中2小時，建立缺血缺氧性腦損傷動物模型并對其行為進行觀察。根據(jù)實驗設計取各組新生大鼠腦組織，用組織化學、免疫組織化學和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyltransferasemediatednickendlabeling，TUNEL)在光鏡下觀察腦組織的病理改變，通過免疫組化法測定HSP70陽性細胞數(shù)及用TU

3、NEL法測定凋亡細胞指數(shù)。 結(jié)果：缺血缺氧后新生大鼠出現(xiàn)不同程度的行為異常。HE染色缺血缺氧后2-6h右側(cè)腦神經(jīng)細胞水腫及少量局灶性壞死，缺血缺氧后72h右側(cè)腦組織中可見界限清楚的壞死灶。正常腦組織內(nèi)未觀察到明顯HSP70陽性細胞及凋亡細胞。缺血缺氧后HSP70陽性細胞數(shù)明顯增加，缺血缺氧后2h即可在皮質(zhì)部位觀察到陽性細胞數(shù)，缺血缺氧后6h-24h明顯，缺血缺氧后48h-72h達到高峰，隨缺血缺氧時間的延長，呈逐漸增高趨勢。缺血

4、缺氧后2h皮質(zhì)部位出現(xiàn)凋亡細胞，缺血缺氧后6h明顯，凋亡細胞出現(xiàn)高峰時間為18h，缺血缺氧后24h逐漸減少，細胞形態(tài)逐漸以壞死為主，缺血缺氧后48h-72h凋亡細胞明顯減少，壞死嚴重。 結(jié)論：HIBD后18h內(nèi)，隨著HSP70的少量合成，神經(jīng)細胞死亡以凋亡為主，此階段神經(jīng)細胞呈可逆性損傷，提示此階段HSP70的合成對缺血缺氧神經(jīng)細胞產(chǎn)生保護作用；HIBD18h后，隨著HSP70大量合成，神經(jīng)細胞以壞死為主，此階段神經(jīng)細胞呈不可逆