不同脂肪酸對下丘腦N38細(xì)胞AgRP表達(dá)和分泌的影響及其信號通路.pdf

1、采食量是影響動物生產(chǎn)性能的重要因素之一。目前認(rèn)為，下丘腦食欲中樞的信號整合在“食欲調(diào)控網(wǎng)絡(luò)”中扮演著重要的作用。下丘腦弓狀核促采食神經(jīng)元能夠感應(yīng)營養(yǎng)物質(zhì)如葡萄糖、脂肪酸和氨基酸等濃度的變化，從而刺激AgRP蛋白的表達(dá)和分泌，參與控制采食和能量平衡。迄今為止，不同脂肪酸對動物采食調(diào)控的影響及其機(jī)制還不是很清楚。為此，本研究在細(xì)胞水平上，以小鼠下丘腦N38細(xì)胞為模型，采用Western Blot技術(shù)檢測不同脂肪酸作用下AgRP蛋白的表達(dá)及分

2、泌情況，采用定量PCR技術(shù)檢測AgRP、CD36以及代謝相關(guān)基因mRNA的表達(dá)水平，并采用RNA干擾和受體激動劑處理等方法研究和比較不同脂肪酸對炎癥信號通路及胰島素、瘦素信號通路變化的影響。研究結(jié)果如下：
　　（1）不同的脂肪酸對N38細(xì)胞AgRP的表達(dá)和分泌具有不同的影響。其中，100μM的丁酸及油酸、棕櫚酸對N38細(xì)胞AgRP的表達(dá)和分泌無顯著影響；而100μM月桂酸、辛酸以及硬脂酸、肉豆蔻酸能夠顯著促進(jìn)AgRP蛋白的表達(dá)和分

3、泌；而100μM的亞油酸能夠抑制AgRP蛋白的表達(dá)及分泌。
　?。?）10μM和50μM的亞油酸能顯著抑制N38細(xì)胞AgRP蛋白的分泌，當(dāng)濃度增加到100及300μM時，還能夠顯著抑制AgRP蛋白的表達(dá)；硬脂酸及月桂酸在10、50及100μM均能顯著促進(jìn)AgRP蛋白的表達(dá)和分泌。
　?。?）100μM亞油酸與LPS共處理后，顯著逆轉(zhuǎn)了TLR4蛋白及TLR4依賴的炎癥通路蛋白JNK/IKKα/β的抑制效應(yīng)；干擾TLR4后，硬脂

4、酸顯著逆轉(zhuǎn)了蛋白TLR4及TLR4依賴的JNK蛋白的表達(dá)；而月桂酸也能夠逆轉(zhuǎn)TLR4及IKKα/β的促進(jìn)效應(yīng)。表明TLR4通路參與介導(dǎo)了上述脂肪酸對N38細(xì)胞AgRP表達(dá)和分泌的調(diào)節(jié)作用。
　　（4）100μM亞油酸能顯著增加N38細(xì)胞胰島素及瘦素通路的敏感性，與LPS共處理后，胰島素及瘦素通路的敏感性降低，從而逆轉(zhuǎn)了AgRP的抑制作用；而100μM的硬脂酸能顯著抑制胰島素及瘦素信號通路，干擾TLR4受體后，顯著逆轉(zhuǎn)了IRS/Ak

5、t/FoxO1及JAK2/STAT3蛋白降低的效應(yīng)，從而抑制了AgRP蛋白的促進(jìn)作用；100μM月桂酸對胰島素及瘦素通路無顯著影響。
　?。?）100μM的亞油酸能夠顯著降低代謝相關(guān)基因CPT1/FAS的表達(dá)量，而顯著增加CD36 mRNA的表達(dá)量；硬脂酸能夠顯著增加CPT1/FAS及CD36的表達(dá)量；100μM的月桂酸對ACCα/FAS/CPT1/UCP2及CD36的表達(dá)量均無顯著影響。
　　綜上所述，不飽和脂肪酸——亞油