IGF-1基因轉(zhuǎn)染骨髓間質(zhì)干細(xì)胞移植對糖尿病大鼠骨折愈合的影響.pdf

1、背景骨折愈合需多種細(xì)胞及生長因子參與，是骨折后機(jī)體自我修復(fù)的復(fù)雜過程。臨床上骨折患者較為常見，糖尿病骨折患者骨折延遲愈合相對較為常見，是臨床亟待解決的問題。我們以前的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)糖尿病大鼠骨折愈合過程中局部骨痂組織及血清中胰島素樣生長因子-1（Insulin-like growth factor-1，IGF-1）表達(dá)減少是導(dǎo)致骨折延遲愈合的原因之一。我們通過后續(xù)的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，體外高糖環(huán)境下胰島素樣生長因子-1基因可成功轉(zhuǎn)染骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(

2、Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells，BMSCs)，并促進(jìn)轉(zhuǎn)染后骨髓間質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞的分化，使IGF-1表達(dá)量增加，那么將基因轉(zhuǎn)染后的BMSCs移植入糖尿病大鼠骨折局部，能否增加IGF-1的表達(dá)及能否促進(jìn)糖尿病大鼠骨折愈合，為驗(yàn)證這一設(shè)想，我們設(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)，將體外IGF-1基因轉(zhuǎn)染的BMSCs移植于糖尿病大鼠骨折局部，檢測糖尿病大鼠血清及骨痂中IGF-1的表達(dá)情況，并觀察骨折愈合情況。
　　

3、目的：觀察胰島素樣生長因子-1（IGF-1）基因轉(zhuǎn)染的骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)移植對糖尿病大鼠骨折愈合的影響，探討糖尿病骨折的基因療法。
　　 方法：Wistar雄性6周齡大鼠50只，隨機(jī)分為對照組、實(shí)驗(yàn)組，鏈脲佐菌素(STZ)腹腔注射誘導(dǎo)為糖尿病模型，所有大鼠均造成右側(cè)脛骨骨折，體外高糖環(huán)境下Ad-IGF-1轉(zhuǎn)染BMSCs，然后將IGF-1基因轉(zhuǎn)染的BMSCs移植于實(shí)驗(yàn)組大鼠骨折局部，將未行基因轉(zhuǎn)染的BMSCs移植于對照組

4、大鼠骨折局部，于術(shù)后第1、2、3、4、6周拍攝X線片，取骨折處局部骨痂行HE染色，并行免疫組化染色檢測骨痂中IGF-1的表達(dá)，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測血清IGF-1的量。
　　 結(jié)果：(1)X線示:實(shí)驗(yàn)組第6周骨折線模糊不清，骨折基本愈合，而對照組仍可見透光骨折線影。(2)免疫組化示，第4周局部骨痂中IGF-1灰度值:實(shí)驗(yàn)組為103±5，對照組為109±4（P＜0.05）。(3)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測，第4周血清IGF-