散發(fā)性結(jié)直腸癌發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān)基因定位及外周血癌細(xì)胞富集研究.pdf

1、目的：（1）為了全面了解2號(hào)、5～18號(hào)染色體上結(jié)直腸癌相關(guān)的抑癌基因缺失情況,尋找與腫瘤發(fā)生及轉(zhuǎn)移相關(guān)的位點(diǎn),篩選可能的抑癌基因,對(duì)83例散發(fā)性結(jié)直腸癌進(jìn)行等位基因的雜合缺失分析.（2）用磁激活細(xì)胞分選技術(shù)富集并分離結(jié)直腸癌患者外周血循環(huán)中的腫瘤細(xì)胞,探討其對(duì)腫瘤轉(zhuǎn)移診斷和治療的意義.方法：（1）用2號(hào)、5～18號(hào)染色體上269個(gè)多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記引物（平均距離為8.8cM）對(duì)83例散發(fā)性結(jié)直腸癌者基因組DNA擴(kuò)增相應(yīng)的微衛(wèi)星位點(diǎn),用A

2、BI PRISM377測(cè)序儀進(jìn)行基因掃描,統(tǒng)計(jì)各位點(diǎn)雜合缺失率,以及在不同分化、分期腫瘤間的差異.（2）手術(shù)前抽取21位結(jié)直腸癌患者和9位對(duì)照者的外周血,標(biāo)記帶磁珠的細(xì)胞角蛋白（CK）抗體,經(jīng)磁柱富集CK<'+>上皮細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢其含量,并比較患者組與對(duì)照組以及不同Dukes分期之間CK<'+>含量的差異.結(jié)果：（1）在研究的269個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記中,217個(gè)獲得有效數(shù)據(jù),16個(gè)位點(diǎn)雜合缺失率超過(guò)35﹪,集中分布于18q、17p、5q