新型胸苷酸合成酶抑制劑洛拉曲克抗增殖作用的差異及其機理的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、盡管目前對洛拉曲克作用機理的研究提示其主要作用于TS,但尚無對洛拉曲克作用后TSmRNA和蛋白質(zhì)水平的動態(tài)變化規(guī)律進行研究,因此該文的目的在于:證實洛拉曲克在不同細胞中的跨膜轉(zhuǎn)運是否存在差異,研究TSmRNA和蛋白質(zhì)水平在洛拉曲克作用后的動態(tài)變化規(guī)律,以探討洛拉曲克抗增值作用機理的多樣性.方法:以大鼠膠質(zhì)瘤C6細胞、小鼠腹水瘤肉瘤SRS-82細胞、人大腸癌LoVo細胞、人正常肝臟Lo2細胞為實驗細胞系.用MTT法確定4株細胞對洛拉曲克的

2、敏感性.在細胞膜水平,以上述三種腫瘤細胞在不同濃度的洛拉曲克處理不同時間后以高效液相色譜法測定細胞內(nèi)藥物濃度,比較不同腫瘤細胞中洛拉曲克跨膜轉(zhuǎn)運有無差異.在TSmRNA水平,上述4種細胞在用不同劑量的洛拉曲克處理不同的時間后提取總RNA,以RT-PCR法檢測TS和β-actin的mRNA,以TS/β-actin的比率反應TS mRNA的動態(tài)變化.在蛋白質(zhì)水平,以不同濃度的洛拉曲克處理人LoVo細胞和Lo2細胞不同的時間,分別以流式細胞法

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