化學材料修飾紫杉醇的研究.pdf

1、紫杉醇(paclitaxel，商品名taxol)，是從紅豆杉科紅豆杉屬植物短葉紅豆杉(Taxusbrevifolia)的樹皮中提取分離得到的，是一個復雜的二萜類化合物。它具有誘導和促進微管蛋白聚合抑制其解聚的作用，阻滯有絲分裂，抑制腫瘤細胞的分裂和增殖。對卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多系統(tǒng)腫瘤都有良好的治療效果。但紫杉醇是脂溶性的，幾乎不溶于水，且半衰期短。目前使用的針劑采用聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)和無水乙醇等體積混合穩(wěn)定助溶

2、，而CremophorEL有嚴重副作用，臨床使用不方便。本研究選用四種化學材料以不同方法修飾紫杉醇，以期增加紫杉醇的水溶性或制備紫杉醇的緩釋微球/微囊，實現(xiàn)免用CremophorEL或延長紫杉醇在血漿中的半衰期的目的。 采用化學材料聚乳酸和乙醇酸的共聚物(poly(lactic-co-glycolicacid)，PLGA)和海藻酸鈉制備了PLGA-paclitaxel微球以及海藻酸鈉-paclitaxel微囊和微球，利用光學顯微

3、鏡和掃描電鏡對制備的微球和微囊進行了形態(tài)學的觀察，用HPLC法測定紫杉醇在介質(zhì)中的釋放情況，用MTT法測定IC50，用荷瘤裸鼠實驗評價體內(nèi)抑瘤活性。采用化學合成的方法在紫杉醇的側(cè)鏈上連接親水性的聚乙二醇和乳糖，制備并純化出PEG化的mPEG-paclitaxel和兩種乳糖修飾的紫杉醇(TS1和TS2)，通過1HNMR以及紅外光譜對產(chǎn)物進行了結構鑒定，對其水溶性、熔點以及體內(nèi)外的抑瘤活性進行了初步的評價，并對乳糖修飾的紫杉醇對腫瘤細胞周期

4、以及凋亡的影響進行了檢測。 制備的海藻酸鈉-paclitaxel微囊/微球形態(tài)較好，呈規(guī)則圓形，粒徑均勻，平均粒徑256μm。冷凍干燥后呈不規(guī)則球形，顆粒長徑約100μm，表面形成皺襞。海藻酸鈉-paclitaxel微囊載藥量在25％左右，而海藻酸鈉-paclitaxel微球不足10％。海藻酸鈉微球與微囊均具有緩釋作用，在體外均呈現(xiàn)明顯的兩相釋放特點，海藻酸鈉-paclitaxel微球在30天時可以緩慢釋放85％的藥物，體外實驗

5、證明微囊/微球具有緩釋作用并保留了抑瘤活性。 PLGA-紫杉醇微球呈光滑球形，平均粒徑7-37μm，微球包封率在90％以上，載藥量為40％左右。PLGA-紫杉醇微球具有緩釋作用，在體外的釋放也呈現(xiàn)兩相釋放特點，其抑瘤活性與紫杉醇從微球內(nèi)的釋放密切相關，釋放充分并能維持較長時間的有效藥物濃度，達到更好的抑瘤效果。 采用化學合成方法通過以琥珀酸酐作為架橋?qū)⒕垡叶己腿樘沁B接到紫杉醇的側(cè)鏈上，制備出PEG-紫杉醇和兩種乳糖修飾

6、的紫杉醇(TS1和TS2)，經(jīng)1HNMR以及紅外光譜對產(chǎn)物進行了結構、熔點、水溶性的測定，并對其抑瘤活性進行了評定。結果表明，連接聚乙二醇和乳糖后紫杉醇的水溶性增加，抑制腫瘤的活性沒有明顯的改變。連接上PEG后，PEG可以將更多的紫杉醇帶入腫瘤細胞內(nèi)更好的發(fā)揮細胞毒作用。在所選擇的五種細胞株中，TS1和TS2對肝癌細胞SMMC-7721的IC50值分別為82.8nM和348.2nM。TS1和TS2對腫瘤細胞周期有明顯的干擾作用，細胞阻滯