紫杉醇納米脂質(zhì)體的臨床前研究.pdf

1、目的:本試驗嘗試制備紫杉醇納米脂質(zhì)體(PTXN)，利用PTXN的生物利用度高、減小用量來降低紫杉醇毒性，通過一系列的研究來探索其生物效應，為紫杉醇在癌癥治療應用方面的深入研究提供實驗基礎。
　　方法:采用薄膜分散高壓均質(zhì)法制備PTXN。通過大鼠尾靜脈注射PTXN及紫杉醇注射液，建立HPLC法測定血漿中的紫杉醇藥物濃度，測定動物體內(nèi)藥物動力學參數(shù)。采用上下法作進行PTXN急性毒性實驗。采用HPLC測定PTXN在大鼠體內(nèi)分布和家兔體內(nèi)

2、藥物動力學。選用清潔級SD大鼠按高、中、低劑量組(42.0、21.0、10.5mg/kg)和對照組，重復給藥，觀察動物毒性反應，最終取死大鼠進行組織病理檢查對PTXN的慢性毒性進行評價。通過形態(tài)學觀察、MTT試驗PTXN和PTX對體外培養(yǎng)的癌細胞增殖活性的影響。建立移植腫瘤動物模型，觀察PTXN和紫杉醇注射液對腫瘤的抑制作用、對動物一般狀態(tài)的影響，并檢測肝功能和骨髓像改變以評價PTXN的體內(nèi)抗瘤活性。
　　結果:薄膜分散高壓均質(zhì)法

3、制得的PTXN大小均勻、分散性好、粒徑在190nm左右、包封率為73.52％，4℃下保存3個月穩(wěn)定。HPLC法測定血漿中的紫杉醇藥物濃度，紫杉醇在0.51μg/mL-25.60μg/mL的血藥濃度范圍內(nèi)線性良好(r=0.9997)，回歸方程為Y=46632x+19140。
　　PTXN的動物體內(nèi)藥物動力學表明PTXN及市售PTX血濃經(jīng)時曲線均符合二室模型，主要藥動學參數(shù)t(1/2α)分別為(1.301±0.213)、(0.516±

4、0.228)h;t(1/2β)分別為(34.361±5.981)、(11.223±1.191)h;Vd分別為(0.621±0.078)、(0.823±0.079)L;CL分別為(0.038±0.017)、(0.098±0.012)L·h-1;K(10)分別為(0.044±0.011)、(0.136±0.018) h-1;K(12)分別為(0.238±0.041)、(0.768±0.251)h-1;K(21)分別為(0.332±0.056

5、)、(0.589±0.189)h-1;AUC(0→24)分別為(341.123±19.342)、(198.124±23.857)mg·h·L-1;AUC(0→∞)分別為(735.201±168.260)、(269.298±35.435)mg·h·L-1。
　　PTXN靜脈注射毒性小于LD50為200 mg/kg，在器官中的蓄積程度從高到低:肝＞肺＞心臟＞腎＞血漿＞脾。PTXN能顯著降低心、肺、脾、腎、血漿肝外器官的組織紫杉醇濃度，

6、慢性毒性試驗對器官無明顯毒性反應。
　　PTXN對體外培養(yǎng)的人肺腺癌細胞SPC-A1在濃度為10.0μg/mL時，其抑制率83.3％，對A549細胞的抑制率為59％，對HepG2細胞抑制率為74.375％，不同濃度的PTXN對人卵巢癌細胞SKOV3的抑制率為79％、64％、46％、30％、15％，游離紫杉醇抑制率分別為70％、56％、37％、25％、11％，相比之下PTXN各濃度點的抑制率更高。對其他癌細胞也有不同程度的抑制作用。

7、PTXN(15mg/(kg·d)3d)，對小鼠S180實體型的抑瘤率為45.29％，PTXN（10 mg/kg，3次）對SOSP M成骨肉瘤裸鼠的抑瘤率為40％，PTXN（20mg/kg，iv，每周五天，連續(xù)三周）對HepG2移植瘤的抑瘤率為75.24％，與同樣劑量紫杉醇注射液組比較無顯著性差異。
　　結論:PTXN具有良好的組織靶向性，對器官無明顯的毒副作用。PTXN及PTX血濃經(jīng)時曲線均符合二室模型，兩種制劑的t(1/2α),