石竹DichAG、DichSTK基因克隆與表達(dá)探究.pdf

1、石竹（Dianthus chinensis）為石竹科石竹屬多年生草本花卉，是具有較高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的中國(guó)傳統(tǒng)觀賞花卉。研究發(fā)現(xiàn)AG亞家族基因與雌蕊、雄蕊發(fā)育有關(guān)，且和植物重瓣性狀有一定關(guān)聯(lián)。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究石竹中的DichAG、DichSTK基因，探究其在石竹花發(fā)育過(guò)程中的作用及在不同器官中的表達(dá)模式，為探究石竹花型形成機(jī)理提供基礎(chǔ)，為生產(chǎn)培育優(yōu)良性狀的石竹屬新品種提供技術(shù)支持。主要結(jié)果如下：
　　1.石竹中AG亞家族中DichAG、Di

2、chSTK基因的克?。嚎寺×耸裰蠨ichAG、DichSTK基因，石竹DichAG開放閱讀框?yàn)?50 bp，編碼249個(gè)氨基酸；DichSTK開放閱讀框?yàn)?99 bp，編碼232個(gè)氨基酸。分別擴(kuò)增石竹重瓣親本CH和單瓣親本DH的AGAMOUS基因的各內(nèi)含子，并與日本的香石竹的序列進(jìn)行比對(duì)。石竹的第3-6個(gè)內(nèi)含子和香石竹的內(nèi)含子在長(zhǎng)度上有差異，第6個(gè)內(nèi)含子比香石竹大1.2k，在3’多了一個(gè)1651bp的內(nèi)含子，但兩個(gè)親本石竹間沒(méi)有明顯的

3、差異；
　　2. DichAG、DichSTK基因的載體構(gòu)建和遺傳轉(zhuǎn)化：構(gòu)建了DichAG、DichSTK基因的超量表達(dá)載體和干涉載體。用這4個(gè)載體對(duì)石竹DH親本的無(wú)菌苗進(jìn)行轉(zhuǎn)化，成功得到AG基因超量表達(dá)載體2棵轉(zhuǎn)化陽(yáng)性植株；
　　3. DichAG、DichSTK基因的表達(dá)分析：研究石竹重瓣親本CH和單瓣親本DH花苞的花萼、花瓣、雄蕊、雌蕊等四輪器官中DichAG、DichSTK基因的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DH親本中在雄蕊和雌