轉(zhuǎn)錄因子Ets-1及B細(xì)胞異常在系統(tǒng)性紅斑狼瘡發(fā)病機(jī)制中的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：探討轉(zhuǎn)錄因子ETS-1及B淋巴細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子對(duì)系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者B細(xì)胞分化的影響,從而揭示ETS-1在SLE發(fā)病機(jī)制中的作用及與臨床特征的關(guān)系。
　　方法：選取安徽省立醫(yī)院風(fēng)濕免疫科門(mén)診及住院SLE患者31例,均符合美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)2009年修訂的SLE分類(lèi)診斷標(biāo)準(zhǔn)。其中29例為女性,2例為男性,年齡16～55歲,平均(33.77±11.21)歲,排除感染、腫瘤及其他自身免疫病。其中活動(dòng)期20例(SLEDAI評(píng)分>

2、5分),穩(wěn)定期11例(SLEDAI評(píng)分≤5分)。15例正常對(duì)照,其中14例為女性,1例為男性,年齡23～32歲,平均(30.33±3.87)歲。兩組在年齡及性別構(gòu)成方面差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　分離SLE患者和正常對(duì)照外周血單核細(xì)胞(PBMC),采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)PBMC中CD19-CD138+漿細(xì)胞與CD19+B細(xì)胞比值的變化;并利用磁珠分選技術(shù)獲得CD19+B細(xì)胞;應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)B細(xì)胞ETS-1mRNA表達(dá);采集

3、SLE患者和正常人的血清,存貯于-80℃冰箱,統(tǒng)一檢測(cè)。采用ELISA法檢測(cè)血清中B細(xì)胞分化相關(guān)細(xì)胞因子APRIL、IL-10水平,具體操作嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。分析CD19-CD138+/CD19+細(xì)胞比值、不同分組SLE患者B細(xì)胞ETS-1mRNA的表達(dá)量、臨床指標(biāo)及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)的相關(guān)性。
　　結(jié)果：①SLE組與正常對(duì)照組相比B細(xì)胞ETS-1mRNA的表達(dá)水平顯著下降(Z=-4.218,P<0.01);②SLE組與正常對(duì)照組相

4、比CD19+B細(xì)胞比例下降((4.67±2.55)％vs(6.8±2.23)%,P=0.008)、CD19-CD138+漿細(xì)胞比例((0.41±0.3)%vs(0.2±0.18)%,P=0.02)及CD19-CD138+B細(xì)胞/CD19+漿細(xì)胞比值((0.13±0.1)%vs(0.03±0.02)%,P<0.01)均明顯上升,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;③SLE組ETS-1mRNA表達(dá)水平與CD19-CD138+漿細(xì)胞比例呈負(fù)相關(guān)(r=-0.35

5、9,P=0.047),與CD19-CD138+/CD19+細(xì)胞比值也呈負(fù)相關(guān)(r=-0.493,P=0.005),正常對(duì)照組ETS-1mRNA表達(dá)水平與CD19-CD138+漿細(xì)胞比例、CD19-CD138+/CD19+細(xì)胞比值無(wú)明顯相關(guān)性;④活動(dòng)期SLE患者血清中IL-10((8.36±4.02)pg/mlvs(4.63±4.73)pg/ml,P=0.027)及APRIL水平((49.45±21.15)ng/mlvs(34.90±12

6、.97)ng/ml,P=0.047)顯著高于穩(wěn)定組,與CD19+B細(xì)胞無(wú)顯著相關(guān)性,與CD19-CD138+漿細(xì)胞(r=0.388,P=0.031;r=0.407,P=0.023)及CD19-CD138+/CD19+細(xì)胞比值(r=0.423,P=0.018;r=0.417,P=0.02)呈正相關(guān);⑤SLE活動(dòng)組患者B細(xì)胞ETS-1mRNA的表達(dá)量與血清中IL-10(r=-0.779,P<0.01)及APRIL水平(r=-0.576,P=