PI3K在犬體外循環(huán)缺血再灌注心肌胰島素抵抗發(fā)生機(jī)制中的作用.pdf

1、目的：檢測在體外循環(huán)（CPB）缺血再灌注心肌胰島素抵抗過程中磷脂?；?-激酶（PI3K）的表達(dá)，了解心肌細(xì)胞是否通過PI3K來誘導(dǎo)葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-4（Glut-4）的轉(zhuǎn)運(yùn)，進(jìn)一步探討體外循環(huán)心肌胰島素抵抗的受體后發(fā)生機(jī)制。
　　 方法：健康雜種犬24條，隨機(jī)分為四組，組Ⅰ（n=6）主動脈阻斷30min；組Ⅱ（n=6）主動脈阻斷120分鐘；組Ⅲ（n=6）主動脈阻斷30min+胰島素（PI3K激活劑）；組Ⅳ（n=6）主動脈阻斷30

2、min+渥曼青霉素（PI3K抑制劑）。分別于CPB轉(zhuǎn)流前、開放主動脈后15min、45min、75min時同時采集動脈、冠狀靜脈竇血標(biāo)本與心肌組織標(biāo)本。應(yīng)用放射免疫法檢測并比較各組血標(biāo)本葡萄糖、胰島素，比較相應(yīng)時間點(diǎn)血漿葡萄糖、胰島素、胰島素抵抗指數(shù)（IRI）的變化。用PCR技術(shù)測定PI3K表達(dá)；在相應(yīng)時點(diǎn)取到的左心室心肌用免疫組化技術(shù)檢測心肌細(xì)胞包膜及胞漿Glut-4的變化。
　　 結(jié)果：1.心肌葡萄糖代謝：缺血再灌注后血漿葡

3、萄糖較轉(zhuǎn)流前不同程度明顯增高，于再灌注15min達(dá)峰值（P<0.05）。與組Ⅰ比較，組Ⅱ再灌注后血漿葡萄糖增高明顯（P<0.05）；組Ⅳ血漿葡萄糖增高程度更重、持續(xù)更久（P<0.01）。2.胰島素抵抗指數(shù)：四組體外循環(huán)期間IRI均明顯上升，在缺血再灌注后15min達(dá)到峰值，并且75min仍持續(xù)較高水平，與轉(zhuǎn)流前比較，差異有顯著性（P<0.01）。與組Ⅰ比較，組Ⅱ和組Ⅳ更重、恢復(fù)更慢、持續(xù)更久（P<0.05）；3.心功能情況：心肌缺血再灌

4、注后15min各組左室收縮壓（INSP）和左室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）均明顯降低，左室舒張末壓（LVEDP）均明顯升高（P<0.01），此后逐漸恢復(fù)。與組Ⅰ比較，組Ⅱ再灌注后變化明顯，恢復(fù)減慢。與組Ⅲ比較，組ⅣINSP及±dp/dtmax下降更明顯，LVEDP升高更顯著（P<0.01）。4.心肌細(xì)胞Glut-4外膜百分比：與轉(zhuǎn)流前比較，于再灌注15min，組Ⅰ～Ⅲ外膜百分比值下降達(dá)低谷（P<0.01），于再灌注75min有

5、不同程度緩慢上升；而組ⅣGlut4外膜百分比值持續(xù)減低，于再灌注75min達(dá)低谷（P<0.01），與組Ⅰ比較，再灌注后組Ⅱ外膜百分比值下降明顯，持續(xù)時間長（P<0.05）。與組Ⅲ相比較，組Ⅳ再灌注后外膜百分比值下降更明顯，持續(xù)時間更長（P<0.01）。5.PI3K表達(dá)變化：缺血再灌注后心肌細(xì)胞PI3K表達(dá)均不同程度下降；與組Ⅰ比較，組ⅣPI3K表達(dá)下降明顯（P<0.01），而組ⅢPI3K表達(dá)增強(qiáng)（P<0.05）。
　　 結(jié)論：C