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文檔簡(jiǎn)介
1、實(shí)驗(yàn)一:
目的:
觀察FFA作用下胰島βTC3細(xì)胞和高脂喂養(yǎng)大鼠胰腺組織TCTP表達(dá)的改變以及Lira對(duì)此細(xì)胞水平上改變的干預(yù)作用。
方法:
1.將βTC3細(xì)胞分為5組,即對(duì)照組和FFA組(0.125,0.25,0.5及1mmol/L),孵育24h后,Western blot方法檢測(cè)TCTP的表達(dá)。再分為對(duì)照組,F(xiàn)FA組,和FFA+Lira組(0.5mg/L和1mg/L),Lira預(yù)孵育6h后,1
2、mmol/LFFA繼續(xù)孵育24h,Western blot檢測(cè)TCTP和活性caspase-3的表達(dá)。
2.12只成年SD雄性大鼠隨機(jī)分為兩組,正常飲食組(ND,n=6)和高脂飲食組(HFD,n=6),分別給予普通和高脂飼料喂養(yǎng)20周后檢測(cè)血脂確定高脂大鼠成模。實(shí)時(shí)定量PCR和Western Blot分別檢測(cè)兩組大鼠胰腺TCTP mRNA和蛋白相對(duì)表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.不同濃度FFA孵育24h后,0.5m
3、mol/L和1mmol/L FFA組TCTP表達(dá)下調(diào)(P<0.05);與1mmol/LFFA組相比,0.5mg/L Lira+1mmol/L FFA和1mg/LLira+1mmol/L FFA組TCTP表達(dá)上調(diào)(P<0.05),活性caspase-3表達(dá)下調(diào)(P<0.05),兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
2.與ND組相比,HFD組血甘油三酯(HFD1.18±0.06 vs ND0.89±0.03,mmol/L,P<0
4、.01)和總膽固醇(HFD2.37±0.13 vs ND1.77±0.12,mmol/L,P<0.01)升高;胰腺組織TCTPmRNA和蛋白表達(dá)水平兩組無差異(P>0.05)。
結(jié)論:
1.一定濃度的FFA作用能夠下調(diào)βTC3細(xì)胞TCTP的表達(dá),而Lira可以減輕FFA水平異常導(dǎo)致的βTC3細(xì)胞TCTP的下調(diào),上調(diào)TCTP的表達(dá)可能是Lira抗凋亡作用的一個(gè)機(jī)制。
2.高脂喂養(yǎng)的SD雄性大鼠胰腺TCTP m
5、RNA和蛋白表達(dá)無變化。
實(shí)驗(yàn)二:
目的:
探討FFA作用下胰島βTC3細(xì)胞PERK的表達(dá)及Lira對(duì)其表達(dá)的干預(yù)作用。
方法:
βTC3細(xì)胞,分為對(duì)照組和FFA組(0.125,0.25,0.5及1mmol/L)孵育24h,Western blot方法檢測(cè)PERK的表達(dá)。然后,分為對(duì)照組,F(xiàn)FA組和FFA+Lira組(0.5mg/L和1mg/L),Lira預(yù)孵育6h后,1mmol/L F
6、FA繼續(xù)孵育24h,Western blot檢測(cè)PERK的表達(dá)。
結(jié)果:
1.不同濃度FFA孵育24h后,與對(duì)照組相比,1mmol/LFFA組PERK表達(dá)增加(P<0.05)。
2.與1mmol/L FFA組相比,0.5mg/L Lira+1mmol/L FFA和1mg/L Lira+1mmol/L FFA組PERK表達(dá)減少(P<0.05),兩組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.05)。
結(jié)論:
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