利拉魯肽在高糖環(huán)境下對體外培養(yǎng)的小鼠前成骨細胞MC3T3-E1增殖、分化和凋亡的影響.pdf

1、背景：骨質(zhì)疏松作為糖尿病的一種慢性并發(fā)癥，隨著糖尿病患病率增加，糖尿病骨質(zhì)疏松的患病率也逐年增加。在治療糖尿病的同時也要對骨質(zhì)疏松進行治療。研究發(fā)現(xiàn)部分降糖藥物在降低血糖的同時也對骨代謝產(chǎn)生影響。胰高糖素樣肽1(glucagon-likepeptide-1，GLP-1)類似物作為一種新型的降糖藥物，廣泛用于臨床，其不僅具有降糖作用，還有胰腺外作用。GLP-1對小鼠成骨細胞的影響，目前國內(nèi)外報道少見。
　　目的：研究不同濃度 GLP

2、-1類似物-利拉魯肽在高糖環(huán)境下對小鼠前成骨細胞株MC3T3-E1增殖、分化及凋亡的影響。
　　方法：⑴選用傳代小鼠前成骨細胞株MC3T3-E1，給予16.5 mmol/L高糖培養(yǎng)基培養(yǎng)，應(yīng)用不同濃度的利拉魯肽（10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L）處理培養(yǎng)的成骨細胞48h，同時設(shè)立對照組（利拉魯肽0 mol/L），采用CCK-8比色法檢測成骨細胞增殖率、流式細胞儀檢測細胞凋亡率、實時熒光定量PCR法檢

3、測成骨細胞分化標志物COL-Ⅰ、ALP和OPN基因的表達，Western blots檢測凋亡蛋白Bcl-2相關(guān)X蛋白（Bcl-2-associated X protein，Bax）和抗凋亡蛋白B細胞淋巴瘤/白血病基因-2（B-cell lymphoma/lenkemia-2，Bcl-2）的表達。⑵數(shù)據(jù)用xˉ±s表示，采用SPSS l7.0統(tǒng)計分析軟件對實驗數(shù)據(jù)進行分析,多組總體比較采用單因素方差分析(One-way ANOVE)，組間兩

4、兩比較采用LSD-t檢驗。檢驗水準α=0.05。
　　結(jié)果：①與對照組相比，利拉魯肽干預組（10-9 mol/L、10-8 mol/L、10-7 mol/L）細胞增殖率均顯著高于對照組（P<0.05），以10-8 mol/L利拉魯肽促進成骨細胞增殖的作用最顯著。②與對照組相比，利拉魯肽干預組Ⅰ型膠原、堿性磷酸酶和骨橋蛋白的mRNA表達量明顯增加（P<0.05），在10-8 mol/L濃度組表達量增加最明顯。③與對照組相比，不同濃度

5、利拉魯肽干預組成骨細胞早期凋亡率明顯降低(P<0.05)，組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計學意義，且在10-8 mol/L濃度下凋亡率最低。④與對照組相比，利拉魯肽干預組抗凋亡蛋白Bcl-2表達明顯增多，且隨著利拉魯肽濃度增高，Bcl-2蛋白表達呈遞增趨勢，組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計學意義。與對照組相比，利拉魯肽干預組促凋亡蛋白Bax表達明顯降低，且隨著利拉魯肽濃度增高，Bax蛋白表達呈遞減趨勢，組間兩兩比較差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論：