自噬對PD細胞模型中細胞周期的可能調控作用的研究.pdf

1、目的：
　　 1．觀察MPP+對PC12細胞的活性氧水平、LDH漏出率及凋亡率的影響，并觀察RAPA對MPP+所致細胞損傷的拮抗作用；
　　 2．觀察MPP+對PC12細胞的活性氧水平、LDH漏出率及凋亡率的影響，并觀察3-MA對MPP+所致細胞損傷的協(xié)同作用；
　　 3．觀察MPP+對PC12細胞的細胞周期的影響，并觀察RAPA和3-MA對細胞周期的影響。
　　 方法：
　　 用1.0mM的MP

2、P+處理PC12細胞24h，同時分別予RAPA和3-MA進行干預：LDH試劑盒檢測上清液中的LDH活性；流式細胞技術檢測細胞凋亡率、活性氧和細胞周期的分布。
　　 結果：
　　 1．MPP+處理細胞24h，細胞活性氧水平顯著增高(P＜0.001)，上清液中LDH漏出率顯著升高(P＜0.001)，細胞凋亡率增加(P＜0.001)，G2/M期細胞明顯增多(P＜0.001)；
　　 2.25mM的RAPA顯著降低細胞的

3、活性氧水平(P＜0.001)，減少LDH漏出率(P＜0.001)，并抑制細胞凋亡(P＜0.001)，細胞阻滯于G0/G1期(P＜0.001)。
　　 3.10mM的3-MA干預MPP+處理的細胞后，進一步增加細胞內(nèi)的活性氧水平(P＜0.05)，顯著增加LDH的漏出率(P＜0.001)，促進細胞凋亡(P＜0.001)，G2/M期細胞進一步增多(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 1．誘導自噬對MPP+所致的PC1

4、2細胞損傷表現(xiàn)出良好的拮抗作用；
　　 2．抑制自噬可加重MPP+所致PC12細胞的氧化應激損傷；
　　 3．MPP+重啟細胞周期進入S期，不能完成完整的細胞周期，而阻滯于G2/M期，促進細胞凋亡的發(fā)生；誘導自噬使細胞阻滯于G0/G1期，部分抵抗MPP+所誘導的氧化應激，抑制細胞凋亡的發(fā)生；相比之下，抑制自噬加速了細胞進入G2/M期，損耗了細胞對MPP+所誘導的氧化應激的抵抗，促使細胞凋亡增加。（因此，從我們的實驗中可初