活化的巨噬細(xì)胞在外傷性視神經(jīng)損傷修復(fù)中的作用.pdf

1、目的：(1)通過建立中國白兔外傷性視神經(jīng)損傷動物模型，觀察并比較視神經(jīng)損傷后是否聯(lián)合晶狀體損傷時(shí)視網(wǎng)膜、視神經(jīng)單核/巨噬細(xì)胞浸潤與視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞軸突再生的關(guān)系，探討單核/巨噬細(xì)胞在視神經(jīng)損傷修復(fù)中的作用。(2)應(yīng)用SPIO作為對比劑進(jìn)行視網(wǎng)膜、視神經(jīng)磁共振成像，對視神經(jīng)損傷聯(lián)合晶狀體損傷后單核/巨噬細(xì)胞在組織內(nèi)的遷徙、存活情況進(jìn)行動態(tài)觀察，為臨床提供一種通過動態(tài)觀察單核/巨噬細(xì)胞的變化規(guī)律監(jiān)測視神經(jīng)損傷修復(fù)過程的新方法。
　　方

2、法：成年中國白兔共64只，體重2～2.5kg，選取右眼作為實(shí)驗(yàn)組，左眼作為對照組，每組各64眼。實(shí)驗(yàn)組(視神經(jīng)聯(lián)合晶狀體損傷組)：應(yīng)用液壓沖擊顱腦損傷儀(FluidPercussionBrainInjuryDevice，F(xiàn)PI)建立外傷性視神經(jīng)損傷動物模型，同時(shí)用半寸針灸針從眼球赤道部垂直刺入鞏膜5～6mm，損傷晶狀體赤道部，建立視神經(jīng)聯(lián)合晶狀體損傷模型。對照組(單純視神經(jīng)損傷組)：應(yīng)用FPI建立單純外傷性視神經(jīng)損傷動物模型。每組按照損

3、傷后1、2、4、7、10、14、21、28天等觀察時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)分為8個(gè)亞組，每亞組8只。分別在各觀察時(shí)間點(diǎn)之前24h，經(jīng)兔耳緣靜脈注射SPIO(Resovist；Schering，Berlin，Germany)，0.2mmol/kg。分別于損傷前及損傷后各觀察時(shí)間點(diǎn)行雙眼閃光視覺誘發(fā)電位(Flash-VisualEvokedPotential，F(xiàn)-VEP)及視神經(jīng)磁共振成像(MagneticResonanceImaging，MRI)檢測；

4、檢測后摘取雙眼眼球行視網(wǎng)膜、視神經(jīng)組織病理學(xué)特殊染色及免疫組化檢測。
　　結(jié)果：(1)F-VEP：實(shí)驗(yàn)組損傷后10天內(nèi)潛伏期逐漸延長(P<0.05)，10天后潛伏期逐漸縮短(P<0.05)；振幅在損傷后7天內(nèi)逐漸降低(P<0.05)，7天后逐漸升高(P<0.05)。對照組損傷后14天內(nèi)潛伏期逐漸延長(P<0.05)，14天后有縮短趨勢(P<0.05)；振幅在傷后10天內(nèi)逐漸降低(P<0.05)，10天后有反彈的趨勢，但是這種反彈趨

5、勢無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。傷后28天實(shí)驗(yàn)組與對照組的振幅差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(2)視神經(jīng)MRI：損傷前中國白兔視神經(jīng)清晰可見呈中等信號，眶內(nèi)結(jié)構(gòu)規(guī)整。損傷后1天右眼晶狀體形狀不規(guī)整，雙眼視神經(jīng)距眼球2.0～4.5mm處信號增高，眶內(nèi)結(jié)構(gòu)紊亂；損傷后10天中國白兔右眼視神經(jīng)周圍可見大量低信號，而左眼仍以高信號為主，雙眼視神經(jīng)周圍結(jié)構(gòu)紊亂；損傷后28天中國白兔雙眼眼視神經(jīng)周圍信號不均，左眼視神經(jīng)周圍仍可見少量高信號。(3

6、)視網(wǎng)膜病理：實(shí)驗(yàn)組損傷后4天視網(wǎng)膜、視神經(jīng)開始出現(xiàn)活化的單核/巨噬細(xì)胞，之后逐漸增多，到10天達(dá)到最高峰，10天以后活化的單核/巨噬細(xì)胞數(shù)量逐漸減少，28天后消失；而對照組各亞組損傷后不同時(shí)間點(diǎn)均未監(jiān)測到活化的單核/巨噬細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)組損傷后4天視網(wǎng)膜開始出現(xiàn)軸突再生的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，之后逐漸增多，而對照組各亞組損傷后不同時(shí)間點(diǎn)均未監(jiān)測到軸突再生的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞。
　　結(jié)論：(1)視神經(jīng)損傷后，活化的單核/巨噬細(xì)胞能夠促進(jìn)RGC