造血干細(xì)胞移植術(shù)后遲發(fā)性出血性膀胱炎的病因?qū)W研究.pdf

1、目的：(1)研究多瘤病毒感染與造血干細(xì)胞移植（HSCT)術(shù)后遲發(fā)性出血性膀胱炎(HC)的相關(guān)性。(2)研究造血干細(xì)胞移植術(shù)后遲發(fā)性出血性膀胱炎的相關(guān)危險(xiǎn)因素。 方法：(1)病例資料：2006年8月30日至2008年4月18日間接受造血干細(xì)胞移植術(shù)（HCST)血液系統(tǒng)疾病患者共113例，其中男性68例，女性45例，中位年齡33歲(10~62歲)。其中急性髓細(xì)胞白血病32例，急性淋巴細(xì)胞白血病22例，慢性髓細(xì)胞白血病27例，其他疾病

2、32例。根據(jù)疾病狀態(tài)分別采取自體移植29例，同胞全相合異基因移植51例，無(wú)關(guān)供體全相合異基因移植24例，單倍體半相合異基因移植9例。根據(jù)移植類型預(yù)處理分別采取改良BUCY，TBI+CY，BEAM等方案。根據(jù)HC發(fā)生情況將所有HSCT患者分為2組(HC組與非HC組)，根據(jù)發(fā)病級(jí)別將所有HC患者分為3組(1級(jí)、2級(jí)、3-4級(jí))。 (2)病毒檢測(cè)：在移植前一周至移植后出院當(dāng)周，每周一次，連續(xù)收集所有移植患者的清晨中段尿和外周血。40名

3、健康成人做對(duì)照。用病毒DNA提取試劑盒提取血漿和尿液中病毒DNA。PCR擴(kuò)增多瘤病毒DNA，BamH I內(nèi)切酶酶切多瘤病毒PCR產(chǎn)物，區(qū)分BK病毒與JC病毒，瓊脂糖凝膠電泳觀察陽(yáng)性條帶。制備BK病毒DNA質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品，實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)BK病毒陽(yáng)性的尿樣本中BK病毒DNA拷貝數(shù)。熒光免疫組化法檢測(cè)移植后患者外周血巨細(xì)胞病毒(CMV)抗原。普通PCR擴(kuò)增腺病毒DNA。探討各類病毒在遲發(fā)性出血性膀胱炎中的作用。 (3)比較HC組與非H

4、C組在性別、年齡、疾病類型、移植類型、預(yù)處理方式、aGVHD、BK病毒尿、巨細(xì)胞病毒感染、重癥感染等方面的差別。研究造血干細(xì)胞移植術(shù)后遲發(fā)性出血性膀胱炎的相關(guān)危險(xiǎn)因素。 結(jié)果：(1)移植及HC發(fā)病情況：113例HSCT患者成功植入109例，其中有22例發(fā)生HC(發(fā)病率19.5％)，均為異基因移植患者(占異基因移植的26.2％)，包括1級(jí)7例，2級(jí)11例，3級(jí)3例，4級(jí)1例。HC中位發(fā)生時(shí)間為移植后44(13~114)天。

5、 (2)病毒檢測(cè)結(jié)果：普通PCR檢測(cè)113例HSCT患者尿液660份，其中50例患者檢出多瘤病毒(檢出率44.2％)，包括BK病毒49例，JC病毒1例。實(shí)時(shí)定量PCR檢測(cè)尿BK病毒DNA拷貝數(shù)，最低拷貝數(shù)24.4 copies/μl，最高拷貝數(shù)1.03×10 9 copies/μl。所有HSCT患者在移植不同時(shí)間段的外周血共270份、健康對(duì)照者尿液40份，均未檢出多瘤病毒。22例HC患者中21例經(jīng)普通PCR檢出多瘤病毒尿，均為BK病毒，

6、檢出率95.5％，明顯高于非HC組(31.9％)，檢驗(yàn)P=0.000。HC患者尿BK病毒首次檢出時(shí)間為移植后25.09±16.63天，早于HC發(fā)病時(shí)間(移植后47.42±29.02天)，t檢驗(yàn)P=0.002。所有HC患者尿BK病毒持續(xù)陽(yáng)性時(shí)間為6(1~22)周，長(zhǎng)于HC持續(xù)時(shí)間11(1~38)天。3個(gè)不同級(jí)別HC患者在HC發(fā)病時(shí)間，持續(xù)時(shí)間，BK病毒首次檢出時(shí)間上無(wú)明顯差異，但3~4級(jí)HC患者尿BK病毒持續(xù)檢出陽(yáng)性時(shí)間為(13±8)周，

7、明顯長(zhǎng)于1級(jí)和2級(jí)患者，分別為(6±3)周、(5±4)周，經(jīng)方差分析，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.855，P=0.042)。HC患者尿BK病毒初次陽(yáng)性時(shí)病毒DNA拷貝數(shù)平均水平在10 4copies/μl，HC發(fā)生時(shí)病毒拷貝數(shù)明顯上升，66％患者超過(guò)10 5copies/μl，HC緩解后降至10 4copies/μl。3~4級(jí)HC患者在HC發(fā)病前和發(fā)病當(dāng)周病毒拷貝數(shù)平均水平均在10 5copies/μl以上，高于1級(jí)和2級(jí)患者(10 4c

8、opies/μl左右)。非HC患者尿中BK病毒平均拷貝數(shù)水平在(10 3~10 4)copies/μl，低于HC患者。113例HSCT患者中21例檢出巨細(xì)胞病毒抗原血癥，9例為HC患者，HC患者中發(fā)生率為40.9％，高于非HC患者(13.2％)，經(jīng)X2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(X2=7.778，P=0.005)。HC患者CMV抗原血癥檢出時(shí)間與HC發(fā)生時(shí)間分布接近，分別為移植后35天和45天，秩和檢驗(yàn)P=0.278。所有HC患者發(fā)病前后、非

9、HC患者移植一個(gè)月內(nèi)，共250份尿液及血液標(biāo)本，40份對(duì)照者尿液均未檢出腺病毒。 (3)HC危險(xiǎn)因素分析：22例HC患者中10例并發(fā)重癥感染(45.5％)，9例并發(fā)CMV抗原血癥(40.9％)，9例并發(fā)II-Ⅳ度aGVHD(40.9％)，均高于非HC組，經(jīng)X2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為X2=16.033，？=0.000；X2=7.778，？=0.005；X2=7.778，？=0.005)。結(jié)果顯示aGVHD發(fā)生時(shí)間與HC發(fā)生時(shí)

10、間分布接近，中位時(shí)間分別為移植后30天和44天，經(jīng)秩和檢驗(yàn)P=0.185。單因素分析顯示無(wú)關(guān)供體和親緣半相合移植、含CTX、Bu、ATG/ALG的預(yù)處理方案、CMV感染、BK病毒尿、Ⅱ-Ⅳ度aGVHD、重度感染與HSCT術(shù)后遲發(fā)性HC有關(guān)，將上述因素引入COX比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型，多因素分析顯示僅BK病毒尿、Ⅱ-Ⅳ度aGVHD為HC的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(相對(duì)危險(xiǎn)系數(shù)分別為RR=8.911，P=0.004；RR=2.687，P=0.028)。