黃藤素納米粒的初步研制.pdf

1、黃藤素具有抗細(xì)菌真菌和瘧原蟲(chóng)及病毒等藥理作用，但由于水溶性差和肝臟首過(guò)效應(yīng)強(qiáng)致使其生物利用度低(僅為10％左右)。本研究利用納米粒增大藥物溶解度，保護(hù)藥物免遭肝藥酶降解和延長(zhǎng)血液循環(huán)時(shí)間等優(yōu)勢(shì)來(lái)增加機(jī)體對(duì)黃藤素的攝取，即以聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)為載體對(duì)傳統(tǒng)的黃藤素劑型進(jìn)行改造。在建立紫外分析方法的基礎(chǔ)上，以影響納米粒質(zhì)量的因素為考察指標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)初選和正交設(shè)計(jì)優(yōu)化，制備出黃藤素聚氰基丙烯酸正丁酯納米粒并對(duì)其穩(wěn)定性、安全性、

2、藥效學(xué)和釋藥性能等進(jìn)行了初步研究。 1.黃藤素紫外檢測(cè)方法的建立。建立黃藤素紫外分光檢測(cè)方法便于制劑含量的測(cè)定和體外釋藥的研究。用紫外分光光度計(jì)對(duì)其吸收波長(zhǎng)、標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)、回收率和精密度等進(jìn)行研究。結(jié)果表明，黃藤素在273.5nm處有最大吸收峰，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)在5μg/ml～25μg/ml范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好，其平均回收率為98.58％，進(jìn)樣重復(fù)性的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為2.7％，日間和日內(nèi)精密度RSD均小于1％。本研究所建立的分析方法操

3、作簡(jiǎn)便，穩(wěn)定可靠且重現(xiàn)性好，可滿(mǎn)足黃藤素制劑研制的需要。 2.黃藤素納米粒的制備及質(zhì)量評(píng)價(jià)。采用乳化聚合法制備黃藤素納米粒(F-PBCA-NP)并對(duì)其質(zhì)量進(jìn)行評(píng)價(jià)。以納米粒的形態(tài)、粒徑、載藥量和包封率為考察指標(biāo)，通過(guò)單因素試驗(yàn)確定表面活性劑、PH值、溫度、攪拌速度、附加劑和栽藥方式；運(yùn)用Lg(34)正交設(shè)計(jì)以影響黃藤素納米粒質(zhì)量的主要因素即黃藤素濃度(A)，BCA．用量(B)，Dextran-70+PluronicF-68(1：

4、1)用量(C)為因素來(lái)優(yōu)化制備工藝；用透射電鏡、激光粒度分析儀和低溫超速離心對(duì)其理化性質(zhì)進(jìn)行研究。結(jié)果表明，在Dextran-70+PluronicF-68(1：1)為表面活性劑、pH值2.5、溫度25℃、攪拌速度800r/min、Na2S2O5作附加劑及一步法載藥條件下，按優(yōu)化工藝即黃藤素1.5mg/ml、氰基丙烯酸正丁酯BCA2.0mg/ml、Dextran-70+PluronicF-68(1：1)4.0mg/ml，制備的黃藤素納米

5、粒為均勻圓整的類(lèi)球形實(shí)體粒子，平均粒徑(72+5)nm，載藥量50.9％，包封率67.8％。故該制備工藝穩(wěn)定可靠且能滿(mǎn)足對(duì)制劑的質(zhì)量要求。 3.黃藤素納米粒的急性毒性試驗(yàn)。觀察黃藤素納米粒的急性毒性反應(yīng)。將黃藤素水溶液和黃藤素納米粒給小鼠多次灌胃后，觀察小鼠產(chǎn)生的急性毒性反應(yīng)癥狀并記錄死亡情況，計(jì)算出黃藤素納米粒的最大耐受量(MTD)、半數(shù)致死量(LD50)及其95％可信限。結(jié)果顯示，黃藤素納米粒的最大耐受量是其水溶液的4.7倍

6、；其LD50為1706.85mg/kg。故黃藤素納米粒對(duì)小鼠無(wú)毒性，符合臨床用藥的安全性要求。 4.黃藤素納米粒的體外抑菌和抗感染試驗(yàn)。觀察黃藤素納米粒的體外抑菌和抗感染作用。以金黃色葡萄球菌和大腸桿菌考察黃藤素納米粒的體外抑菌活性：以金黃色葡萄球菌感染的小鼠為試驗(yàn)動(dòng)物，用小鼠的存活率、重要臟器的重量指數(shù)變化及病變程度為評(píng)判指標(biāo)，對(duì)其抗感染作用進(jìn)行觀察，并與非納米化的普通制劑進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明，黃藤素各制劑對(duì)金黃色葡萄球菌和大腸

7、桿菌的抑菌圈直徑均大于10mm，其納米粒的抗菌活性與其他制劑相比有所提高；黃藤素納米?？墒垢腥窘鹌暇∈蟠婊盥蔬_(dá)到80％而普通制劑為35％，減輕脾臟重量指數(shù)和病變程度也分別比普通制劑明顯高。故黃藤素納米粒的抑菌效果比片劑和膠囊明顯增強(qiáng)。 5.黃藤素納米粒的體外釋藥試驗(yàn)。了解黃藤素納米粒的體外釋藥特點(diǎn)。以黃藤素片劑和膠囊為對(duì)照，用透析法考察黃藤素納米粒的體外釋藥特性，繪制累積釋放曲線(xiàn)并用六種常用的釋放模型方程對(duì)釋藥曲線(xiàn)進(jìn)行擬合。結(jié)