子宮內(nèi)膜異位癥細(xì)胞黏附分子的變化及補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀法對(duì)其影響.pdf

1、目的：子宮內(nèi)膜異位癥(以下簡(jiǎn)稱“內(nèi)異癥”)是婦科疑難病之一，多發(fā)于育齡期婦女。內(nèi)異癥的發(fā)病機(jī)制有多種學(xué)說(shuō)，被大多數(shù)人認(rèn)可的為Sampson提出的經(jīng)血逆流學(xué)說(shuō)。進(jìn)入腹腔的內(nèi)膜在異位的生長(zhǎng)首先是內(nèi)膜細(xì)胞的黏附。近來(lái)，細(xì)胞黏附分子的黏附作用日益引起人們的重視。目前西醫(yī)治療主要采用藥物及手術(shù)的方法，但存在停藥后易復(fù)發(fā)、副作用大、價(jià)格昂貴等問(wèn)題。本研究的目的是通過(guò)臨床觀察及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，觀察補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀法治療內(nèi)異癥的療效，并從細(xì)胞黏附分子方面探討其作

2、用機(jī)制。 方法： 1、臨床研究：選自2005年10月～2006年12月在石家莊市四院就診，符合內(nèi)異癥診斷標(biāo)準(zhǔn)、納入標(biāo)準(zhǔn)、排除標(biāo)準(zhǔn)及中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)的內(nèi)異癥患者30例，服用補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀中藥者，連續(xù)服用3個(gè)月經(jīng)周期，觀察期間不得服用與本病癥有關(guān)的其他中西醫(yī)藥物，于治療前后空腹采集肘靜脈血3ml，離心取上清液，置于-70℃冰箱保存待測(cè)；行手術(shù)治療者30例，術(shù)中抽取腹腔液3～4毫升；對(duì)照組血清來(lái)自無(wú)心、腦、肝、腎、血液病及內(nèi)分泌疾病

3、的自愿受試者30名，空腹采集肘靜脈血3ml，離心吸取上清液，置于-70℃冰箱保存待測(cè)；對(duì)照組腹腔液來(lái)自同期因子宮肌瘤行手術(shù)治療的患者30例，術(shù)中抽取腹腔液3～4毫升30例。全部患者均知情同意，并除外心腦肝腎疾病，治療前3個(gè)月無(wú)激素類藥物治療史，月經(jīng)規(guī)律，各組年齡比較分布均衡，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性。觀察項(xiàng)目：(1)參照中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)婦產(chǎn)科專業(yè)委員會(huì)第三屆學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的標(biāo)準(zhǔn)擬定療效判定標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)統(tǒng)計(jì)治愈率；(2)檢測(cè)治療前后血清

4、及腹腔液中細(xì)胞黏附分子(sICAM-1，sVCAM-1)的含量變化及血清內(nèi)分泌激素(E<,2>，P)、CAl25的水平的改變。 2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：選用動(dòng)情周期正常的健康清潔級(jí)SD雌性大鼠60只，體重200±50克。60只大鼠隨機(jī)選取10只做為正常對(duì)照組；其他50只根據(jù)Jones方法復(fù)制內(nèi)異癥大鼠模型。制模4周后選擇造模成功的大鼠，隨機(jī)數(shù)字表方法分為中藥低劑量組、中藥高劑量組、丹那唑組、模型組4組，每組10只。低、高劑量組分別按15

5、.41克、61.76克/千克(分別相當(dāng)于臨床成人劑量的5倍、20倍)給予補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀中藥灌胃，每日一次，連用4周；丹那唑組按25毫克/日，給予丹那唑水溶液灌胃，連用4周；模型組及對(duì)照組給予同體積的蒸餾水。末次給藥后，禁食8小時(shí)，選擇動(dòng)情期的大鼠斷頭處死，無(wú)菌操作剖腹測(cè)量各組異位灶的體積大小；取出各組在、異位內(nèi)膜組織，吸去血液，于4％多聚甲醛溶液中固定，常規(guī)石蠟包埋，5 μm厚連續(xù)切片，進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色，測(cè)定內(nèi)膜組織中細(xì)胞間黏附分子-

6、1(ICAM-1)、核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-k B)的表達(dá)。 結(jié)果： 1、臨床研究表明，中藥組經(jīng)補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀法治療3療程后，臨床治愈7例(23.33％)，顯效9例(30.00％)，有效6例(20.00％)，無(wú)效8例(26.67％)，總有效22例，總有效率為73.33％。中藥組治療前與正常對(duì)照組血清P含量比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，中藥組治療前與正常對(duì)照組血清E<,2>含量相比較升高，有顯著性差異(P<0.01)。

7、 中藥組治療后血清P與治療前比較顯著升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，E<,2>與治療前比較顯著降低，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。血清中siCAM-1、sVCAM-1中藥組治療前與正常對(duì)照組比較顯著升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05，P<0.01)，治療前后均有顯著性差異(均P<0.01)；腹腔液中siCAM-1、sVCAM-1中藥組與正常對(duì)照組比較均含量升高，有顯著性差異(P<0.01，P<0.05)。血清CAl25中藥組治療

8、前與正常對(duì)照組比較顯著升高(P<0.01)，治療前后有顯著性差異(P<0.01)。 2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：治療4周后，中藥高劑量組與模型組比較，異位灶的體積明顯減小，差異有顯著性(P<0.01)，治療后與治療前比較異位灶體積明顯減小，差異有顯著性(P<0.01)；中藥低劑量組與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；丹那唑組與模型組比較，異位灶的體積也有所減小，差異有顯著性(P<0.01)。組織學(xué)觀察：中藥高劑量治療組異位內(nèi)膜組織腺體數(shù)目少，腺

9、腔小，腺上皮細(xì)胞呈柱狀，而模型組異位內(nèi)膜組織，腺體數(shù)目較多。ICAM-1蛋白陽(yáng)性染色定位于腺上皮細(xì)胞漿內(nèi)。模型組ICAM-1表達(dá)增多，與對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.01)，高、低劑量組與丹那唑組ICAM-1表達(dá)均低于模型組(均P<0.01)，高劑量組與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)。NF-k B蛋白陽(yáng)性染色定位于腺上皮胞質(zhì)內(nèi)。正常大鼠NF-k B表達(dá)較少。模型組NF-k B多表達(dá)于胞質(zhì)，與對(duì)照組比較顯著升高(P<0.05)，

10、高劑量組和丹那唑組NF-k B的表達(dá)與模型組比較均降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01，P<0.01)，低劑量組NF-k B的表達(dá)與模型組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。在位內(nèi)膜組織NF-k B活性與ICAM-1表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.698，P<0.05)。 結(jié)論： 1、補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀法治療內(nèi)異癥不僅可縮小病灶，松解盆腔粘連，減輕盆腔瘀血，緩解疼痛，而且能夠調(diào)節(jié)患者卵巢功能，具有用藥副反應(yīng)小的特點(diǎn)，不失為臨床治療內(nèi)異癥的

11、有效方法之一。 2、內(nèi)異癥患者體內(nèi)siCAM-1、sVCAM-1含量有不同程度的升高，我們認(rèn)為其可能干擾內(nèi)異癥患者體內(nèi)的免疫環(huán)境，有利于異位內(nèi)膜的黏附，在內(nèi)異癥發(fā)病中起到關(guān)鍵作用。 3、內(nèi)異癥模型大鼠內(nèi)膜內(nèi).NF-k B的活性增強(qiáng)，與ICAM-1的蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，提示ICAM-1的黏附作用增強(qiáng)可能與NF-k B的表達(dá)增強(qiáng)有關(guān)。補(bǔ)腎溫陽(yáng)化瘀法通過(guò)調(diào)節(jié)內(nèi)膜中NF-k B的活性來(lái)調(diào)節(jié)細(xì)胞黏附分子的表達(dá)，從而達(dá)到治療內(nèi)異癥的效