DSPP、Enamelin基因片斷的克隆及其在牙胚的表達(dá)檢測(cè).pdf

1、牙齒的發(fā)育與其他器官相似，也是依賴于預(yù)定牙齒發(fā)生部位的上皮組織與其下方的間充質(zhì)之間的相互誘導(dǎo)而發(fā)生的，經(jīng)過(guò)一系列有序和交互的作用，牙上皮分化為成釉質(zhì)細(xì)胞，而間充質(zhì)細(xì)胞分化為成牙本質(zhì)細(xì)胞，各自合成分泌基質(zhì)蛋白并最終形成牙釉質(zhì)和牙本質(zhì)。 牙釉質(zhì)和牙本質(zhì)作為牙齒的代表性結(jié)構(gòu)，可作為牙胚發(fā)育分化的形態(tài)學(xué)指標(biāo)，檢測(cè)成釉質(zhì)細(xì)胞和成牙本質(zhì)細(xì)胞的發(fā)育分化則可以從細(xì)胞生物學(xué)水平判斷牙胚的發(fā)育分化情況。細(xì)胞的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)可以作為細(xì)胞發(fā)育分化的依據(jù)，

2、但檢測(cè)細(xì)胞的分化情況僅從組織學(xué)、形態(tài)學(xué)水平檢測(cè)遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，必須建立分子水平的檢測(cè)方法。為此，本實(shí)驗(yàn)克隆了人和小鼠的DSPP、Enamelin基因片斷，然后制備特異性的人和小鼠DSPP、Enamelin基因片斷的mRNA反義探針，再將其分別與人或小鼠含有成牙本質(zhì)細(xì)胞或成釉質(zhì)細(xì)胞的牙胚組織進(jìn)行原位雜交，檢測(cè)DSPP、Enamelin基因表達(dá)情況以此確定我們制備的4個(gè)探針的組織特異性及種屬特異性，進(jìn)而建立一種從基因轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)人、小鼠成牙本質(zhì)細(xì)