樹舌多糖GF注射液對HepA瘤細(xì)胞可溶性蛋白質(zhì)組影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：研究樹舌多糖GF注射液對HepA瘤細(xì)胞可溶性蛋白質(zhì)組的影響，從蛋白質(zhì)組水平進(jìn)一步研究樹舌多糖GF注射液抗腫瘤的作用機(jī)理。 方法：①抑瘤率：將各組完整的瘤組織稱重，計(jì)算其抑瘤率。②可溶性蛋白的SDS-PAGE：根據(jù)分子量不同分離蛋白質(zhì)，觀察樹舌多糖GF注射液對蛋白質(zhì)組分的影響。③可溶性蛋白的雙向電泳：用雙向凝膠電泳的方法對瘤組織蛋白進(jìn)行分離，觀察樹舌多糖GF注射液對蛋白質(zhì)組分的影響。 結(jié)果：①給藥組與腫瘤組瘤重比較有

2、顯著差異(P＜0.01)，抑瘤率為61.5％;②在可溶性蛋白的單向SDS-PAGE中，正常組經(jīng)分離得到16個(gè)蛋白質(zhì)組分條帶，腫瘤組得到24個(gè)蛋白質(zhì)組分條帶，樹舌多糖組得到18個(gè)蛋白質(zhì)組分條帶。與正常組相比，腫瘤組有3個(gè)蛋白質(zhì)組分條帶表達(dá)下調(diào)，11個(gè)蛋白質(zhì)組分條帶表達(dá)上調(diào)。樹舌多糖GF注射液可以使腫瘤細(xì)胞3條表達(dá)下調(diào)的蛋白質(zhì)組分條帶和8條表達(dá)上調(diào)的蛋白質(zhì)組分條帶恢復(fù)至正常水平。③在可溶性蛋白的雙向電泳中，運(yùn)用PDQuest軟件對掃描后的給

3、藥組和腫瘤組雙向電泳凝膠進(jìn)行處理，經(jīng)斑點(diǎn)檢測，匹配和量化，腫瘤組分離得到101個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，樹舌多糖組分離得到85個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)。僅在腫瘤組出現(xiàn)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有54個(gè)，僅在樹舌多糖組出現(xiàn)的蛋白質(zhì)點(diǎn)有38個(gè)，腫瘤組和樹舌多糖組共有的蛋白質(zhì)點(diǎn)中表達(dá)量相差兩倍以上的點(diǎn)有14個(gè)。對部分清晰可辨的差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行數(shù)據(jù)庫查詢，對差異表達(dá)的蛋白質(zhì)點(diǎn)進(jìn)行了初步判斷。 結(jié)論：(1)樹舌多糖GF注射液對HepA瘤細(xì)胞有明顯的抗腫瘤作用，抑瘤率為61.5％。

4、 (2)樹舌多糖GF注射液對HepA瘤細(xì)胞可溶性蛋白質(zhì)組有質(zhì)和量的影響。 ①在腫瘤組有54種可溶性蛋白特異性表達(dá)，而在樹舌多糖組不表達(dá)，在兩組共表達(dá)的蛋白中，有6種蛋白在樹舌組表達(dá)量明顯降低。這些在樹舌組表達(dá)下調(diào)的蛋白可能是一些與腫瘤發(fā)生、發(fā)展相關(guān)的癌基因表達(dá)的產(chǎn)物。其中的一些可能為肝癌的標(biāo)志性蛋白，還有一些可能作為該藥物作用的靶蛋白，樹舌多糖可以下調(diào)這些蛋白質(zhì)的表達(dá)。 ②在樹舌多糖組有38種可溶性蛋白特異性表達(dá)，而