腦膠質(zhì)瘤增殖、凋亡及端粒酶反義基因治療的實驗研究.pdf_第1頁
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1、第二軍醫(yī)大學(xué)博士學(xué)位論文腦膠質(zhì)瘤增殖、凋亡及端粒酶反義基因治療的實驗研究姓名:王建奇申請學(xué)位級別:博士專業(yè):神經(jīng)外科學(xué)指導(dǎo)教師:張光霽2001.5.1’腦膠質(zhì)瘤增殖、凋亡及端粒酶反義基因治療的實驗研究摘要惡性腫瘤是多岡素、多基岡的疾病,其共同的特征為:止常細胞周JJj機制破上1、,細胞火控性生長和過度增殖;從凋亡角度來看,則是細胞的凋亡機制受到抑制,不能止常發(fā)揮清除惡變細胞作州的結(jié)果。腫瘤細胞增殖、凋亡火衡狀況與病理惡性樣度具有明顯的相

2、關(guān)性,病理惡性科度直接關(guān)系劍臨床治療和預(yù)后。腦膠質(zhì)瘤為顱內(nèi)惡性腫瘤,約’i腦腫瘤總數(shù)的45%,且生存jlj短t術(shù)\/后復(fù)發(fā)率平死亡率高,根治極其困難i/本實驗研究嘗試一、觀察不同惡性級別腦膠質(zhì)瘤增殖、凋、亡的火衡情況,并建立說明其火衡狀態(tài)的指標(biāo)一增殖/凋亡指數(shù)(proliferation/apoptosiSindexP/AI)探討其與膠質(zhì)瘤惡性程度的關(guān)系。二、端粒酶(telomerase)活性在各種人類腫瘤中總的表達率約85%,為目前已

3、知的最廣泛,特異性最高的腫瘤標(biāo)記物。端粒酶活性的表達是細胞獲得無限制的分裂增殖的特征,端粒酶活性水平與膠質(zhì)瘤的惡性級別和預(yù)后相關(guān)。本實驗HJ“反義基岡封條”將端粒酶活性表達抑制,以觀察對惡性膠質(zhì)瘤細胞的抑制作_Ll』。三、化療是腦膠質(zhì)瘤治療不可缺少的重要常規(guī)手段,而腫瘤細胞的耐藥性義為化療火敗的士要原岡,其中最突山的為多藥耐藥(multidrugresistance,MDR)。獲得多約耐約性的腫瘤細胞的明顯特征為mdr過渡表達了】70K

4、D的糖蛋白PgP,該蛋向位丁細胞膜上,作為能越依賴性藥物排出泵,將化療約從細胞內(nèi)泵山,使胞內(nèi)藥是檢測多藥耐藥的確切指現(xiàn)耐約,其表達科度與抗藥性成止比。岡此P“0糖蛋白的抑制可增加腫瘤細胞的化學(xué)敏感性,以相對較低的化療藥物劑苗取得較好的療效。//7第一部分腦膠質(zhì)瘤增殖、凋亡的實驗研究及建立增殖/凋亡指數(shù)/\目的:觀察不同惡性級別膠質(zhì)瘤增殖、凋亡的火衡情況,并建立說明其火衡狀態(tài)的指標(biāo):增殖/凋亡指數(shù),井探討其與膠質(zhì)瘤惡性科度的關(guān)系及此指標(biāo)在

5、膠質(zhì)瘤實驗研究中的廊_lJ。方法:選取腦外傷減壓術(shù)后的1F腫瘤性腦組織8例為對照及不同惡性級別的Ii蠟包埋的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本69例、手術(shù)腦膠質(zhì)瘤新鮮標(biāo)本26例分別行HE染色及以增殖細胞核抗原(PCNA)免疫組化法平原何末端標(biāo)記法(TUNEL)檢測膠質(zhì)瘤細胞增殖平凋亡狀況經(jīng)堿性磷酸酶顯色和熒光標(biāo)記,計算機圖像分析系統(tǒng)及流式細胞儀測域PCNA及TUNEL目f性細胞百分率。設(shè)定不同日l性細胞卣分率范同分別對廊的等級序數(shù),然后,根據(jù)每~標(biāo)本的日i性

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