hTRAIL基因修飾成人骨髓基質(zhì)干細胞靶向腦膠質(zhì)瘤基因治療的研究.pdf

1、惡性膠質(zhì)瘤是原發(fā)性中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中最常見的一種腫瘤，膠質(zhì)母細胞瘤是其中惡性度最高的。本研究將MSCs靶向腫瘤遷徙和TRAIL選擇性殺傷腫瘤細胞結(jié)合探索TRAIL修飾MSCs雙重靶向治療腦膠質(zhì)瘤的可能?！　∈紫葟某扇斯撬柚蟹蛛x出單個核細胞，體外擴增成均一似成纖維細胞樣細胞，其細胞表面CD105、CD166和CD44均為陽性，而CD11b、CD34和CD45均為陰性，在條件培養(yǎng)液下能分化為脂肪細胞、成骨細胞和成軟骨細胞?！　榱诉M一步

2、研究所獲MSCs是否具有向膠質(zhì)瘤細胞遷徙的能力，將AAV-GFP標記的MSCs懸液加入與U87MG共培養(yǎng)。Transwell實驗發(fā)現(xiàn)正常培養(yǎng)液和腦組織溶解物對MSCs的遷徙幾乎無影響，而U87MG腫瘤溶解物、U87MG細胞培養(yǎng)液或U87MG腫瘤細胞能顯著的誘導(dǎo)MSCs向其遷徙。而上述刺激物對NIH3T3細胞的遷徙無明顯差異。在U87MG腦膠質(zhì)瘤模型建立1周后，將LacZ標記的MSCs靜脈途徑移植，發(fā)現(xiàn)腦腫瘤中則可也大量藍色的LacZ均勻

3、分布于其中。　　之后從pROF-Trail質(zhì)粒中獲得全長TRAIL基因片段，并將其重組于pAAV-M2-IGFP載體質(zhì)粒中，生產(chǎn)出高滴度的AAV-CMV-hTRAIL病毒顆粒。將其轉(zhuǎn)染MSCs后，對其表型和細胞活性無明顯影響，MSCs可穩(wěn)定表達膜結(jié)合型TRAIL，同時也表達分泌型TRAIL?！　∽詈?，建立裸鼠腦干膠質(zhì)瘤模型，靜脈或瘤床內(nèi)途徑注射TRAIL修飾的MSCs均能顯著延長腦膠瘤裸鼠的生存期，其中有36％的MSC-TRAIL治