淋巴瘤、白血病和多發(fā)性骨髓瘤與人類皰疹病毒8的相關(guān)性研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文淋巴瘤、白血病和多發(fā)性骨髓瘤與人類皰疹病毒8的相關(guān)性研究姓名：于錦香申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：內(nèi)科學(xué)指導(dǎo)教師：翟明2002.4.1檢標(biāo)本中的D N A 。( 3 ) 提取的D N A 用紫外分光光度計(jì)測定2 6 0 n m 和2 8 0 n m 的光密度( o D ) ，并根據(jù)此O D 值計(jì)算D N A 的濃度和純度，然后用T E 緩沖液調(diào)濃度至1 I tg ／m l 。3 ．引物設(shè)計(jì)采用以H H V - 8 特異

2、性K S 3 3 0 B a r n 片段為模板的引物對(duì)K S l ／K S 2 。4 ．P C R 擴(kuò)增用K S l ／K S 2 引物對(duì)做P C R 擴(kuò)增以檢測獻(xiàn)血員P B M C s ，以及淋巴瘤、自血病、多發(fā)性骨髓瘤患者P B M C s 、B M M C s 、淋巴瘤病理標(biāo)本及骨髓活檢標(biāo)本中的H H V - 8 K S 3 3 0 片段。5 ．P C R 產(chǎn)物的回收用D N A 片段回收試劑盒回收以K S l ／K S 2 擴(kuò)

3、增的2 3 3 b p 產(chǎn)物，用于限制性內(nèi)切酶分析。6 ．P C R 產(chǎn)物的酶切鑒定K S l ／K S 2 擴(kuò)增出的2 3 3 b p 產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶P s t I 作酶切分析鑒定。7 ．流式細(xì)胞儀檢測T 淋巴細(xì)胞亞群應(yīng)用C D 3 ．P E 、C D 4 一F I T C 、C D 8 ．F I T C 鼠抗人單克隆抗體和流式細(xì)胞儀檢測獻(xiàn)血員、淋巴瘤、白血病、多發(fā)性骨髓瘤患者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群。8 ．E L I S A 法檢

4、測血清I L ．6 水平用人I L ．6 定量E L A 試劑盒檢測獻(xiàn)血員及多發(fā)性骨髓瘤患者血清I L 一6含量。9 ．檢測結(jié)果的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析( 1 ) 不同性別、民族、血型和不同年齡段獻(xiàn)血員的H H V - 8D N A 檢出率差異以及淋巴瘤、白血病、多發(fā)性骨髓瘤患者H H V - 8D N A 檢出率與正常對(duì)照的差異用≯檢驗(yàn)進(jìn)行比較分析。( 2 ) 淋巴瘤、白血病、多發(fā)性骨髓瘤患者外周血T 淋巴細(xì)胞亞群檢測結(jié)果與正常對(duì)照的差異以及多發(fā)