LY294002聯(lián)合多柔比星對神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細胞凋亡的影響.pdf

1、目的:通過體外實驗觀察LY294002和ADR聯(lián)合應用對膠質(zhì)瘤U87細胞的抑制效應,并與單純使用LY294002或ADR的療效相比較,從而探討LY294002和ADR聯(lián)合化療膠質(zhì)瘤U87細胞可行性,同時為LY294002和ADR在膠質(zhì)瘤中的聯(lián)合應用提供相應的理論依據(jù)。
　　方法:(1)四甲基偶氮唑鹽[3-(4,5-Dimethyl-thiaoly)-2,5-diphenyl-2H tet razolium bromide,MTT]

2、法檢測LY294002和ADR單獨或者聯(lián)合作用膠質(zhì)瘤U87細胞增殖的影響。(2)流式細胞儀檢測LY294002和ADR單獨或者聯(lián)合作用細胞周期分布及凋亡。(3)應用RT-PCR和蛋白印跡(Westernblotting,WB)法檢測LY294002和ADR單獨或者聯(lián)合作用U87細胞Bax、Bcl-2的表達情況。(4)倒置顯微鏡觀察用LY294002和ADR單獨或者聯(lián)合作用U87細胞形態(tài)變化。
　　結(jié)果:(1)MTT、FCM結(jié)果顯示

3、,與對照組相比,LY294002和ADR單獨或者聯(lián)合作用對U87細胞的生長具有抑制作用,且兩者聯(lián)合后作用更強。(2)RT-PCR及Western-Blotting結(jié)果均顯示,LY294002和ADR單獨或者聯(lián)合作用后,U87細胞中Bcl-2表達降低而Bax表達升高,聯(lián)合后更顯著。(3)倒置顯微鏡觀察用LY294002和ADR單獨處理后,膠質(zhì)瘤細胞逐漸減少,體積變小,胞質(zhì)透亮度下降,顆粒感增強,細胞突觸變短、變圓,部分細胞胞突回縮變圓,脫