LY294002聯(lián)合多柔比星對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的:通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)觀察LY294002和ADR聯(lián)合應(yīng)用對(duì)膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞的抑制效應(yīng),并與單純使用LY294002或ADR的療效相比較,從而探討LY294002和ADR聯(lián)合化療膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞可行性,同時(shí)為L(zhǎng)Y294002和ADR在膠質(zhì)瘤中的聯(lián)合應(yīng)用提供相應(yīng)的理論依據(jù)。
　　方法:(1)四甲基偶氮唑鹽[3-(4,5-Dimethyl-thiaoly)-2,5-diphenyl-2H tet razolium bromide,MTT]

2、法檢測(cè)LY294002和ADR單獨(dú)或者聯(lián)合作用膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞增殖的影響。(2)流式細(xì)胞儀檢測(cè)LY294002和ADR單獨(dú)或者聯(lián)合作用細(xì)胞周期分布及凋亡。(3)應(yīng)用RT-PCR和蛋白印跡(Westernblotting,WB)法檢測(cè)LY294002和ADR單獨(dú)或者聯(lián)合作用U87細(xì)胞Bax、Bcl-2的表達(dá)情況。(4)倒置顯微鏡觀察用LY294002和ADR單獨(dú)或者聯(lián)合作用U87細(xì)胞形態(tài)變化。
　　結(jié)果:(1)MTT、FCM結(jié)果顯示

3、,與對(duì)照組相比,LY294002和ADR單獨(dú)或者聯(lián)合作用對(duì)U87細(xì)胞的生長(zhǎng)具有抑制作用,且兩者聯(lián)合后作用更強(qiáng)。(2)RT-PCR及Western-Blotting結(jié)果均顯示,LY294002和ADR單獨(dú)或者聯(lián)合作用后,U87細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)降低而B(niǎo)ax表達(dá)升高,聯(lián)合后更顯著。(3)倒置顯微鏡觀察用LY294002和ADR單獨(dú)處理后,膠質(zhì)瘤細(xì)胞逐漸減少,體積變小,胞質(zhì)透亮度下降,顆粒感增強(qiáng),細(xì)胞突觸變短、變圓,部分細(xì)胞胞突回縮變圓,脫