大黃素抑制人K562細(xì)胞裸鼠移植瘤生長的機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　 1.觀察大黃素對人K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制作用。
　　 2.探討大黃素誘導(dǎo)人K562細(xì)胞裸鼠移植瘤凋亡的機(jī)制。
　　 方法：
　　 1.1通過描繪腫瘤體積生長曲線、計(jì)算抑瘤率等觀察大黃素對移植瘤生長的影響。通過HE染色及透射電鏡技術(shù)探討大黃素抑制腫瘤生長的機(jī)制。
　　 1.2免疫組化及PCR檢測大黃素作用后移植瘤組織中Bax及Bcl-2的變化。
　　 1.3 PCR及We

2、stern blotting檢測大黃素作用后移植瘤組織中Caspase-3及Caspase-9的變化。
　　 1.4 PCR及Western blotting檢測大黃素作用后移植瘤組織中P13K-AKT信號通路的變化。
　　 結(jié)果：
　　 1.大黃素能夠顯著的抑制K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的生長，具有劑量依賴性；各用藥組抑瘤作用與陰性對照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），高濃度組與羥基脲組具有同等的抑瘤效應(yīng)（P>

3、0.05）。光鏡和電鏡檢測發(fā)現(xiàn)大黃素低，中，高濃度組均可見瘤細(xì)胞凋亡和壞死，其中以高濃度處理組最為顯著，羥基脲處理組部分瘤細(xì)胞以壞死為主。
　　 2.免疫組化結(jié)果表明大黃素處理后腫瘤組織中Bax蛋白表達(dá)上調(diào)，Bcl-2蛋白表達(dá)下調(diào)。RT-PCR結(jié)果顯示大黃素處理后腫瘤組織中Bax mRNA表達(dá)上調(diào)，Bcl-2 mRNA表達(dá)下調(diào)，與對照組比較，差異具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。
　　 3.RT-PCR結(jié)果表明不同劑

4、量的大黃素能夠引起Caspase-3 mRNA和Caspase-9 mRNA的表達(dá)的上調(diào)且有劑量依賴性。Western blotting結(jié)果表明大黃素處理組的procaspase-3和procaspase-9蛋白均出現(xiàn)明顯的下調(diào)。
　　 4.RT-PCR結(jié)果表明不同劑量的大黃素能夠引起：P13K mRNA和AKT mRNA的表達(dá)的下調(diào)；FoxO3a mRNA表達(dá)上調(diào)且有劑量依賴性。Western blotting結(jié)果表明大黃素處

5、理組移植瘤組織中：P13K與AKT蛋白表達(dá)水平明顯降低，而FoxO3a蛋白水平明顯升高。
　　 結(jié)論：
　　 1.大黃素可以明顯抑制K562細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)的生長，其作用呈現(xiàn)出一定的劑量效應(yīng)關(guān)系，大黃素對K562細(xì)胞裸鼠移植瘤的抑制作用是通過誘導(dǎo)凋亡實(shí)現(xiàn)的。
　　 2.大黃素誘導(dǎo)K562細(xì)胞裸鼠移植瘤凋亡可能是通過調(diào)控腫瘤中Bax及Bcl-2的表達(dá)，并與激活Caspase-3和Caspase-9信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及P13