鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥機(jī)制研究.pdf

1、目的： 調(diào)查四川北部地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌的臨床分布特征及耐藥情況，研究其產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶的特性及類型，并對(duì)β-內(nèi)酰胺酶進(jìn)行基因與同源性分析，了解β-內(nèi)酰胺酶在耐藥性形成中的作用，闡明鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的耐藥機(jī)制，為臨床合理用藥提供參考依據(jù)。 方法： 1.對(duì)臨床分離的鮑曼不動(dòng)桿菌作標(biāo)本來源、科室分布的分析，了解其在醫(yī)院感染中的分布特征； 2.用瓊脂二倍稀釋法檢測(cè)臨床常用16種抗菌藥物對(duì)78株鮑曼不動(dòng)

2、桿菌臨床分離株的MIC，分析其對(duì)臨床常用抗菌藥物的耐藥性，獲得耐藥菌株； 3.從耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌株提取β-內(nèi)酰胺酶，用CTL進(jìn)行酶活性檢測(cè)；瓊脂紙片擴(kuò)散法檢測(cè)產(chǎn)超β-廣譜內(nèi)酰胺酶（ESBLs）菌株；提取產(chǎn)酶菌株質(zhì)粒DNA，用特異性酶引物對(duì)質(zhì)粒DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，DNA序列測(cè)定，分析其同源性，以確定產(chǎn)酶基因的位置及類型。 結(jié)果： 1.78株鮑曼不動(dòng)桿菌的標(biāo)本來源主為痰標(biāo)本；科室分布主要在ICU病房。78株鮑曼不動(dòng)

3、桿菌對(duì)MEP耐藥率極低，僅1.3％，對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率37.2％，對(duì)其它13種抗菌藥的耐藥率均在60％以上。但對(duì)IMP完全敏感。 2.經(jīng)對(duì)40株多重耐藥的鮑曼不動(dòng)桿菌酶活性檢測(cè)，有38株產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶；對(duì)21株酶活性高的菌株進(jìn)行瓊脂紙片擴(kuò)散法檢測(cè)，有9株菌產(chǎn)ESBLs。 3.提取21株酶活性高的細(xì)菌的質(zhì)粒DNA經(jīng)PCR擴(kuò)增檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，21株鮑曼不動(dòng)桿菌均擴(kuò)增出TEM型β-內(nèi)酰胺酶基因，其中7株還擴(kuò)增出CTX-M型β-

4、內(nèi)酰胺酶基因，14株擴(kuò)增出SHV型β-內(nèi)酰胺酶基因。21株細(xì)菌中，7株菌的質(zhì)粒DNA擴(kuò)增出TEM、SHV兩種類型的酶基因，7株菌的質(zhì)粒DNA擴(kuò)增出TEM、CTX-M、SHV三種類型的酶基因。 4.DNA測(cè)序結(jié)果顯示本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌攜帶的β-內(nèi)酰胺酶基因主要為bla-TEM-128，同時(shí)也有攜帶bla-SHV和bla-CTX-M的菌株；21株耐藥產(chǎn)酶的鮑曼不動(dòng)桿菌攜帶兩種以上耐藥基因的比例高達(dá)66.6％。 結(jié)論：

5、 1.本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌主要以引起危重病人的呼吸道感染為主。 2.本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌除對(duì)碳青霉烯類抗菌藥物亞胺培南和美洛培南敏感外，對(duì)頭孢哌酮/舒巴坦有一定的敏感性，對(duì)臨床常用其它抗菌藥物，尤其對(duì)一、二、三代頭孢菌素均表現(xiàn)出極高的耐藥性，多重耐藥現(xiàn)象嚴(yán)重，治療多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌感染時(shí)宜首選碳青霉烯類抗菌藥。 3.質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶的產(chǎn)生是本地區(qū)鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素耐藥的重要機(jī)制之一，酶的基因型主要為bl