疏肝理肺方對(duì)慢性應(yīng)激條件下哮喘大鼠血清皮質(zhì)酮及肺組織中TGF-β1-Smad3表達(dá)的影響.pdf

1、目的：依據(jù)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)心理學(xué)應(yīng)激理論和實(shí)驗(yàn)研究方法，結(jié)合支氣管哮喘的特點(diǎn)，復(fù)制慢性應(yīng)激性哮喘大鼠模型，對(duì)慢性應(yīng)激性哮喘大鼠用疏肝理肺方進(jìn)行干預(yù)，測(cè)定血清皮質(zhì)酮含量及肺組織TGF-β1/Smad3的表達(dá)水平變化，探討疏肝理肺方對(duì)慢性應(yīng)激性哮喘的作用機(jī)制。
　　方法：將40只SD雄性大鼠在正常環(huán)境下飼養(yǎng)一周后，采用隨機(jī)數(shù)表法分為4組，即正常對(duì)照組、應(yīng)激哮喘組、地塞米松組、疏肝理肺組。采用卵蛋白皮下注射致敏、氣道吸入刺激氣道上皮激發(fā)，并加用

2、慢性不可預(yù)見(jiàn)性溫和應(yīng)激法(CUMS)，以復(fù)合方法復(fù)制慢性應(yīng)激性哮喘，第15天開(kāi)始，地塞米松組及疏肝理肺組每天分別以地塞米松及疏肝理肺方灌胃。持續(xù)復(fù)合刺激8周后，腹主動(dòng)脈取血，ELISA檢測(cè)血清皮質(zhì)酮含量;取左側(cè)肺組織做HE染色和免疫組織化學(xué)染色，觀察大鼠肺組織炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)情況、測(cè)定支氣管管腔的內(nèi)周長(zhǎng)、管壁面積，支氣管平滑肌面積，定位及半定量測(cè)定肺組織中TGF-β1及Smad3的蛋白表達(dá)情況;右肺組織用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)

3、法測(cè)定肺組織TGF-β1及Smad3的mRNA表達(dá)水平。
　　結(jié)果：ELISA檢測(cè)發(fā)現(xiàn)應(yīng)激哮喘組血清皮質(zhì)酮顯著高于正常對(duì)照組(P＜0.05)，而地塞米松組和疏肝理肺組較哮喘模型組明顯降低(P＜0.05);HE染色顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激哮喘組大鼠支氣管、肺泡及肺間質(zhì)充斥大量炎癥細(xì)胞、粘膜層腫脹充血、皺折增多，大鼠支氣管壁面積和氣道平滑肌面積較正常對(duì)照組顯著增高(P＜0.05)，與應(yīng)激哮喘組相比，地塞米松組及疏肝理肺組上述炎癥癥狀明顯減

4、輕，支氣管壁面積和氣道平滑肌面積厚度明顯減小(P＜0.05);免疫組化顯示，TGF-β1及Smad3的蛋白主要表達(dá)在氣道上皮、平滑肌及炎癥細(xì)胞中，與正常對(duì)照組相比，應(yīng)激哮喘組大鼠肺組織TGF-β1及Smad3的蛋白表達(dá)明顯升高(P＜0.05)，地塞米松及疏肝理肺組TGF-β1及Smad3的蛋白表達(dá)較應(yīng)激哮喘組顯著降低(P＜0.05);RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，應(yīng)激哮喘組大鼠肺組織TGF-β1及Smad3的mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組明顯升高(P