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文檔簡介
1、目的:應(yīng)用組織芯片技術(shù),探討HER-2、COX-2、CD105、Laminin-R、Paxillin在乳腺癌組織中的表達及其意義。 方法:選取我院1995~2000年手術(shù)切除的192例經(jīng)病理學(xué)確診的乳腺浸潤性導(dǎo)管癌存檔蠟塊。低倍鏡下在HE切片上用油性筆標出目標區(qū)域,并在相應(yīng)蠟塊上做出標記,這些蠟塊稱為供體蠟塊。制作硬度適中的受體蠟塊(50mm×30mm×20mm)。手工從192例乳腺癌手術(shù)標本的供體蠟塊及7例已知陽性標本蠟塊(E
2、R、PR、HER-2、COX-2、Paxillin、CD105、Laminin-R、CD105各1例)、7例已知陰性標本蠟塊(ER、PR、HER-2、COX-2、Paxillin、CD105、Laminin-R、CD105各1例)中分別提取直徑為1.2mm的組織芯,插入到受體蠟塊中制作成組織芯片2個。常規(guī)4μm連續(xù)切片后,進行HE染色,除去掉片、無腫瘤組織或腫瘤組織不足以分析的病例,共計160例,即組織芯片的可利用率為83.3﹪。參照E
3、lston和Ellis改良的Scarff-Bloom-Richardson分級法對這160例乳腺浸潤性導(dǎo)管癌進行病理組織學(xué)分級,其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級病例數(shù)分別為64、74、22例;有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者102例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者58例。將含有這160例乳腺癌標本的兩個組織芯片的切片進行免疫組織化學(xué)染色,根據(jù)相應(yīng)的標準對各指標的表達情況進行判斷,并對這幾種檢測指標與乳腺癌病人組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體及孕激素受體表達等臨床-病理指標之間的關(guān)系進
4、行分析。另外,在選定的160例乳腺癌病例中隨機選擇50例病例進行常規(guī)切片,并行上述指標的免疫組織化學(xué)染色,探討組織芯片進行免疫組織化學(xué)檢測的平行性及可靠性。 結(jié)果:乳腺癌組織中HER-2的陽性表達率為35﹪(56/160),COX-2的陽性表達率為55.6﹪(89/160),且HER-2、COX-2的表達均與組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、雌激素受體(ER)陰性表達、孕激素受體(PR)陰性表達顯著相關(guān)(P<0.05或P<0.01);CO
5、X-2與HER-2的表達密切相關(guān)(P<0.01);CD105微血管密度(microvesseldensity,MVD)表達值的高低與腫瘤的組織學(xué)分級、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、ER表達、PR表達均無關(guān);Laminin-R在乳腺癌中的表達率為55.6﹪(89/160),Laminin-R表達值的高低與腫瘤的組織學(xué)分級、ER表達、PR表達無關(guān),但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05);Paxillin在乳腺癌中的表達率為40.6﹪(65/160),Paxill
6、in表達值的高低與腫瘤的組織學(xué)分級以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)(P<0.05),但與ER表達、PR表達無關(guān)。另外,采用組織芯片技術(shù)(單點穿刺)所得到的陽性率與采用傳統(tǒng)的免疫組織化學(xué)染色方法染色得到的陽性率之間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。 結(jié)論:組織芯片的建立使乳腺癌相關(guān)基因及其蛋白產(chǎn)物的篩選工作簡便、快捷;且本實驗表明一式一份的取材方式,嚴格按程序制作的組織芯片,其免疫組織化學(xué)染色方法抗體的表達與普通切片的表達有良好的一致性,可保證
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