載NC-1900納米粒腦內(nèi)靶向遞釋系統(tǒng)的制備和藥效學評價.pdf

1、NC一1900是一種人工合成的六肽小分子化合物，結(jié)構(gòu)與精氨酸血管加壓素4-9活性片段(AVP4-9)相似，具有治療老年性癡呆的活性。動物實驗顯示NC．1900通過皮下或顱內(nèi)注射對模型動物的記憶缺陷具有明顯的改善作用。NC一1900經(jīng)靜脈給藥后，消除快且易被體內(nèi)血漿蛋白酶降解，另外由于其水溶性大不易透過血腦屏障(Bloodbrainbarrier，BBB)，因此關(guān)于NC．1900經(jīng)靜脈注射對治療模型小鼠記憶缺陷的療效至今仍未見報道。本文旨

2、在研究一種可穿透BBB、體內(nèi)穩(wěn)定且能供靜脈注射的新型載NC-1900的陽離子牛血清白蛋白結(jié)合聚乙二醇一聚乳酸納米粒(CBSA-NPs)給藥系統(tǒng)，并考察其對東莨菪堿誘導的小鼠記憶缺陷的修復作用。 采用溶液聚合法合成單甲氧基聚乙二醇一聚乳酸(MPEG-PLA)和馬來酰亞胺基聚乙二醇一聚乳酸(Malei-PEG-PLA)共聚物；采用。HNMR和13CNMR對共聚物進行結(jié)構(gòu)鑒定，并根據(jù)1HNMR譜圖中各特征峰峰面積計算共聚物的數(shù)均分子量

3、。通過考察反應時間和催化劑用量對反應效率的影響，確定最佳的反應條件為d，l一丙交酯(d，I-LA)與MPEG或Malei-PEG以10mL甲苯為反應溶劑，在200mn辛酸亞錫的催化下于llO~C反應24h。1HNMR和13CNMR譜圖中出現(xiàn)與共聚物結(jié)構(gòu)相對應的特征峰，另外，譜圖中均未見其它明顯的雜峰，可見所合成的共聚物具有較高的純度。1HNMR譜圖中存在馬來酰亞胺基的質(zhì)子峰，說明Malei-PEG-PLA共聚物仍保留馬柬酰亞胺基結(jié)構(gòu)。

4、 建立了NC-1900的體外HPLC分析方法，經(jīng)方法學評價表明該方法專屬性強、線性關(guān)系良好、準確度高且重現(xiàn)性好，符合體外樣品測定的要求，可用于載NC-1900的NPs包封率、載藥量和體外釋放樣品的測定。 采用復乳／溶媒蒸發(fā)法制備載NC．1900納米粒(NPs)，通過單因素試驗和L9(34)正交設計優(yōu)化NPs的處方工藝。所制得的NPs包封率約為23％，載藥量約為5％0，粒徑小于100nm，zeta電位約為．12mV。透射電鏡

5、觀察顯示NPs粒子大小均一，外形圓整，并可見明顯的親水性聚乙二醇“外殼”。 采用不同分子量MPEG-PLA共聚物制備載NC-1900的NPs，測定其粒徑、包封率、zeta電位及體外釋放情況，旨在考察共聚物各嵌段分子量對NPs結(jié)構(gòu)性質(zhì)的影響。結(jié)果表明，采用MPEG3000-PLA44800制備的NPs包封率相對較高，粒徑和zeta電位均較理想，且其在pH7．4磷酸鹽氯化鈉緩沖液(PBS)和空白血漿中的釋放較少，可減少血液循環(huán)過程中

6、藥物的過早釋放和損失，適合用于制備載NC一1900的NPs。 MPEG3000-PLA44800和Malei-PEG3400-PLA42900共聚物按10：1的重量比混合，采用復乳／溶媒蒸發(fā)法制備載NC．1900的NPs，然后通過低速攪拌使巰基化CBSA通過二硫鍵共價結(jié)合于NPs表面。所制得的CBSA-NPs粒徑仍小于100am，外形圓整，大小均一，zeta電位約為．8mV，其在pH7．4PBS中比較穩(wěn)定，48h僅釋放約10％，

7、在pH4．0PBS中緩慢釋放，1h約釋放3％，7days約釋放15％。 以東莨菪堿為誘發(fā)劑建立小鼠老年性癡呆模型，采用主動逃避試驗一一跳臺法考察載NC．1900的CBSA-NPs對小鼠記憶缺陷的修復作用，并與NC．1900溶液和未經(jīng)CBSA修飾的載NC-1900的NPs的療效進行比較，進而評價CBSA-NPs的腦內(nèi)遞藥特性。結(jié)果表明，載NC．1900的CBSA-NPs經(jīng)靜脈注射能夠有效地提高模型小鼠的記憶能力，而且可以使其恢復至